采用DAS－ELISA和RT－PCR方法对马兜铃病毒病的研究

温玉洁，赵文龙，葛红霞

（张掖市森林病虫害防治检疫站，甘肃 张掖734000）

马兜铃（Aristolochia debilis Sieb et Zucc）属于马兜铃科（Aristolochiaceae）马兜铃属（Aristolochia）植物，全世界约有450余种，广泛分布在热带和温带地区，我国有56种，其中《中国植物志》记载39种，分别属于管花亚属和马兜铃亚属［1］。主要分布于我国黄河以南及长江流域，是一种用途广泛的中药材。根入药为青木香，有行气止痛，解毒消肿之效；茎入药为天仙藤，能疏风活血；果实入药为马兜铃，能清肺降气，止咳平喘［2］。据调查在陇西就有试种，是一种值得广泛种植并能够带来良好经济效益的中药材之一［3］。

随着马兜铃等中草药在我省的普遍种植，病害开始频繁发生，近年来，据调查，灰霉病发生较重，病毒病也普遍发生。查阅资料，关于中草药的病毒病在国内就有研究报道，如朱本明、陈作义等［4］检测出地黄黄斑病病株中的地黄黄斑病毒；余方平、杨力［5］从河南等地的地黄上分离到4种病毒，其中2种分别鉴定为烟草花叶病毒（Tobacco mosaic virus，TMV）和黄瓜花叶病毒（Cucumber mosaic virus，CMV）；申屠苏苏、王海利等［6］在半夏中检测到的病毒主要为黄瓜花叶病毒的天南星科株系和大豆花叶病毒（Soybean mosaic virus，SMV）的天南星科株系，而关于马兜铃中的病毒病未见报道。因此，笔者对甘肃省马兜铃产区普遍发生的病毒进行检测，以期为马兜铃病毒病的防治提供依据。

关于病毒病的检测技术，目前有很多有效而且快速的方法，常用的有指示植物法、电子显微镜诊断法、PCR检测、血清学检测法等诊断方法［7］。其中PCR检测法是一种选择性体外酶促合成DNA片段的技术，它包括三个基本步骤：变性，退火，延伸。……