宋丽,穆春华,陆晓媛
(1徐州医学院研究生学院,江苏徐州221002;2泗阳县人民医院;3徐州医学院)
复发性流产(RSA)是一类常见的妊娠疾病,其发生与多种因素相关。趋化因子在调节滋养细胞的迁移和侵袭、促进胎盘形成、调节淋巴细胞等方面具有重要作用;当趋化因子和(或)趋化因子受体表达量或活性异常时,可能导致胚胎的早期丢失。目前研究显示,淋巴免疫表型与RSA的发生具有一定的联系,但具体机制尚不明确。为此,本研究对RSA患者外周血淋巴细胞表型及趋化因子水平进行了研究。
1.1 临床资料 选取2012年8月~2013年8月在徐州医学院附属医院妇产科门诊就诊的RSA患者60例(RSA 组),年龄22~38(31.1±5.7)岁。超声诊断发现胚胎发育停止或者枯萎,无胎心搏动,确诊流产。患者均符合RSA的相关标准:流产次数超过2次,染色体检查正常,内分泌系统无异常,无子宫疾病。另选取同期终止妊娠的健康妇女30例作为对照组,年龄 21 ~39(30.3 ±4.3)岁,无流产史,染色体正常,妇科检查指标正常。两组年龄、孕周等差异无统计学意义(P>0.05)。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 RSA组及对照组抽取静脉血5 mL,然后进行吸宫手术;吸宫手术收集的绒毛及蜕膜组织处理后立即用液氮冷却,低温保存。
1.2.2 淋巴免疫表型分布检测 静脉血经处理后,加入荧光标记CD127鼠抗人单抗各20 μL,避光15 min后加入500 μL溶血素,PBS洗涤离心弃去上清,流式细胞仪检测。
1.2.3 血清CCL-2水平检测 参照双抗体夹心酶标免疫分析方法的一般操作要求,对患者血清标本进行CCL-2水平检测,采用酶标仪450 nm测定吸光度,绘制标准曲线,计算CCL-2浓度。……