补肾中药干预雷公藤多甙致雌性幼鼠生殖损伤的实验研究

许静云 李春丽 李园园

补肾中药干预雷公藤多甙致雌性幼鼠生殖损伤的实验研究

许静云 李春丽 李园园

目的研究补肾中药干预雷公藤多甙(GTW)致雌性幼鼠的生殖损伤。方法取SD雌性幼鼠90只(体重均在50 g左右), 随机分为空白组、雷公藤多苷药组(雷公藤组)、雷公藤多苷药物+六味地黄药丸组(六味组), 每组30只。计算雌性大鼠受孕率、产仔总数、离乳存活数。结果空白组在停药0、8周的雌鼠受孕率均为95.8%；雷公藤组在停药0、8周的雌鼠受孕率分别为85.0%和95.0%；六味组在停药0、8周的雌鼠受孕率分别为92.0%和100.0%；三组间差异无统计学意义(P＞0.05)。空白组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为96.7%和96.9%；雷公藤组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为97.0%和97.1%；六味组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为98.0%和97.3%；三组差异均无统计学意义(P＞0.05)。连续用药12周, 空白组的大鼠受孕率最高(95.9%),其次是六味组(91.0%), 最后是雷公藤组(80.0%), 组间有统计学意义(P＜0.05)。连续用药12周后, 雷公藤组的总胎仔数及胎仔离乳存活数最低, 六味组数量最多, 组间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论大鼠性成熟前使用雷公藤多苷对于受孕、产子及后代的发育无影响, 补肾中药能很好的恢复雷公藤多苷对生育能力的影响。

近年来, 雷公藤在治疗各个系统疾病的显著疗效越来越受到人们的关注。它具有祛风除湿、消肿止痛的作用, 可用于治疗免疫系统、泌尿系统、呼吸系统、皮肤病、内分泌等多个系统疾病[1], 具有强大的免疫抑制、抗炎、抗肿瘤、抗菌等作用, 疗效明显, 尤其在治疗儿科肾脏疾病中发挥着重要的作用, 如过敏性紫癜、肾病综合征、紫癜性肾炎、乙肝肾炎、红斑狼疮、狼疮性肾炎、难治性肾病、幼儿类风湿性关节炎等疾病。雷公藤多苷治疗效果显著, 但是, 其副作用也不容忽视, 如性腺损伤、皮肤黏膜损害、胃肠道反应、骨髓抑制、肝功损害等。近年来, 长期服药后可能出现的生殖损伤越来越受到关注。

补肾中药(例如六味地黄丸、菟丝子、熟地等中药)干预雷公藤多苷所致生殖损害临床报道较多。中药复方(熟地、山药、枸杞子等)具有对抗GTW所致的大鼠子宫重量下降的作用[2]。罗雪芹等[3]发现五子衍宗丸、益气活血方对服用雷公藤多苷致的卵巢萎缩有明显的修复作用。省中医学院一附院儿科院长、名老中医丁樱教授运用雷公藤多苷片治疗小儿肾脏疾病已三十余年, 在用药原则、用药剂量、用药疗程以及用药禁忌等方面积累了丰富的临床经验, 得出一些补肾中药在保护雷公藤多苷损伤性腺方面有明显的疗效, 但是缺乏客观指标。本院借鉴丁樱教授的宝贵经验, 以此为切入点, 选择六味地黄丸为补肾中药, 以雌性幼鼠的生仔情况为观察点, 了解补肾中药保护雷公藤多苷致生殖系统损伤的作用, 为临床安全应用雷公藤多苷提供依据。现报告如下。

1 材料与方法

1.1 实验药物 雷公藤多苷粉末：泰州制药有限公司提供。六味地黄丸：北京同仁堂有限公司,9 g/丸。聚阴离子纤维素等。

实验动物的分组：SD雌性幼年大鼠90只,3.5周龄, 平均体重(40±5)g。购置于开封市实验动物中心。5只/笼, 实验室饲养环境温度20～25℃, 湿度45%～60%, 饲料为实验大鼠颗粒饲料。适应1周后, 开始试验。将其随机分为三组：空白组、雷公藤多苷药组(雷公藤组)、雷公藤多苷药物+六味地黄药丸组(六味组),30只/组,6只/笼。

1.2 实验方法

1.2.1 给药量 雷公藤组：剂量按照临床常用剂量1.0 mg/(kg·d),换算成大鼠服用剂量约为6 mg/(kg·d)。六味组：剂量按照临床成人用量1丸/次,3次/d, 换算出大鼠用量约为0.9 g/(kg·d),按照1 g/(kg·d)给药。

1.2.2 给药方法 空白组：灌服聚阴离子纤维素(PAC), 0.3 ml/50 g, q.d.。雷公藤组：使用时用0.5% PAC液配制成每毫升含生药1.5 mg的混悬溶液, 每次0.3 ml/100 g灌胃, q.d.。六味组：六味地黄丸粉碎后研成粉剂, 密闭保存, 防潮。灌胃前使用0.5%PAC配制成每1 ml含生药0.2 g的混悬液, 每次0.3 ml/100 g灌胃, q.d.。再灌服雷公藤多苷液, 剂量同雷公藤多苷组。每周称重1次, 调整剂量。

1.2.3 实验动物的处理 喂药4周后, 开始第1次合笼, 将所有大鼠分笼喂养,2只/笼, 按照2:1比例放入健康成年雄性大鼠1只,2周后取出雄性大鼠(大鼠的性动周期为4～5 d,经历3个周期)。将未受孕的雌鼠与生育能力较强的雄性大鼠于停药4周后开始第2次合笼。将第2次未受孕的雌性大鼠继续与生育能力较强的雄性大鼠于停药8周后开始第3次合笼,3次合笼均需观察雌性成年大鼠有无受孕、有无产仔及小仔存活情况, 仔鼠观察至分娩后21 d。详细记录各组雌性大鼠产仔情况、产仔的数量、离乳存活数量。

1.2.4 计算雌性大鼠受孕率、产仔总数、离乳存活数。

1.3 统计学方法 采用SPSS13.0统计学软件进行数据统计。计数资料采用χ2检验。P＜0.05表示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三组实验雌鼠受孕率 空白组在停药0、8周的雌鼠受孕率均为95.8%；雷公藤组在停药0、8周的雌鼠受孕率分别为85.0%和95.0%；六味组在停药0、8周的雌鼠受孕率分别为92.0%和100.0%；三组间差异无统计学意义(P＞0.05)。

2.2 三组实验雌鼠产仔总数及离乳存活数 空白组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为96.7%和96.9%；雷公藤组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为97.0%和97.1%；六味组在停药0周和停药8周后的雌鼠总胎仔数分别为98.0%和97.3%；三组差异均无统计学意义(P＞0.05)。连续用药12周, 空白组的大鼠受孕率最高(95.9%),其次是六味组(91.0%), 最后是雷公藤组(80.0%), 组间差异有统计学意义(P＜0.05)。连续用药12周后, 雷公藤组的总胎仔数及胎仔离乳存活数最低, 六味组数量最多, 组间差异有统计学意义(P＜0.05)。

3 小结

连续用药12周, 空白组的大鼠受孕率最高(95.9%), 其次是六味组(91.0%), 最后是雷公藤组(80.0%), 组间差异有统计学意义(P＜0.05)；证明雷公藤多苷对性腺损伤是可逆的。

连续用药12周后, 雷公藤组的总胎仔数及胎仔离乳存活数最低, 六味组数量最多, 组间差异有统计学意义(P＜0.05),证明雷公藤多苷对性腺损伤是可逆的。从各组数据仍可以清楚的看出雷公藤多苷具有影响雌鼠生育能力的作用, 在停药8周后, 雷公藤组的雌鼠受孕率及总胎仔数及胎仔离乳存活数较停药0周时增多, 由以上统计数据可以看出六味地黄丸对雷公藤多苷致生殖能力的损伤有修复作用, 提示六味地黄丸恢复雌性幼鼠生育能力效果特别显著。

综上所述, 在大鼠性成熟前使用雷公藤多苷对于受孕、产子及后代的发育无影响, 补肾中药能很好的恢复雷公藤多苷对生育能力的影响。

[1]苏维广, 孟江.雷公藤的临床应用.辽宁中医杂志,2003,30(10):845.

[2]粱文波, 黄彩云, 张学梅, 等.复方雷公藤多苷对雌性大鼠生殖系统的影响.中国临床药理学与治疗学,1999,4(4):319-320.

[3]罗雪芹, 刘家玉, 陈东辉, 等.对雷公藤的减毒增效作用研究.中药药理与临床,2002,18(1):17-18.

Experimental research of tonifying kidney traditional Chinese medicine in intervention of female immature rat reproductive impairment induced by glucosidorum tripterygll totorum

XU Jing-yun, LI Chun-li, LI Yuan-yuan. Kaifeng City Children's Hospital, Kaifeng475000, China

ObjectiveTo research tonifying kidney traditional Chinese medicine in intervention of female immature rat reproductive impairment induced by glucosidorum tripterygll totorum.MethodsA total of90 SD female rats (weight50 g) were randomly divided into blank group, glucosidorum tripterygll totorum group (glucosidorum group), and glucosidorum tripterygll totorum group + Liuwei Dihuang pills group (Liuwei group), with30 cases in each group. Calculation was made on pregnancy rate, total parturition number, and ablactation survival number.ResultsPregnancy rates in 0 and8 weeks of drug withdrawal were all95.8% in the blank group,85.0% and95.0% in the glucosidorum group,92.0% and100.0% in the Liuwei group. There was no statistically significant difference in the three groups (P＞0.05). Total parturition number in 0 and8 weeks of drug withdrawal were96.7% and96.9% in the blank group,97.0% and97.1% in the glucosidorum group,98.0% and97.3% in the Liuwei group. There was no statistically significant difference in the three groups (P＞0.05). After continuous drug administration for12 weeks, the blank group had the highest pregnancy rate (95.9%), followed by the Liuwei group (91.0%) and the glucosidorum group (80.0%). The differences across the three groups had statistical significance (P＜0.05). After continuous drug administration for12 weeks, the glucosidorum group had the lowest total parturition number and ablactation survival number, while those were at the highest level in the Liuwei group. The differences had statistical significance (P＜0.05).ConclusionImplement of glucosidorum tripterygll totorum before sexual maturity of rats has no influences on pregnancy, delivery, and development of offspring. Meanwhile, tonifying kidney traditional Chinese medicine can remarkably restore effected fertility by glucosidorum tripterygll totorum.

Tonifying kidney traditional Chinese medicine; Glucosidorum tripterygll totorum; Female immature rat reproductive impairment

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.16.191

2015-03-16]

475000 开封市儿童医院PICU2

【关键词】补肾中药；雷公藤多甙；雌性幼鼠生殖损伤