不同色谱条件下测定奥美拉唑含量方法的比较研究

【摘要】目的　比较2种不同色谱条件下用高效液相色谱法检测奥美拉唑含量的差异。方法 建立C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系，并分别测定3个不同厂家奥美拉唑的含量，对含量测定结果进行统计学分析。结果C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系测定三家不同厂家奥美拉唑的含量，差异均无统计学意义（P>0.05）。结论 2种不同色谱条件下对奥美拉唑进行含量测定，其测定方法无统计学差异。

doi:10.3969/j.issn.1674-9316.2015.13.137

作者单位：473000 河南省南阳市食品药品检验所

Comparative Study on the Different Chromatographic Conditions of Determining Omeprazole Content

LI Yadong Nanyang Institute for food and drug control， Nanyang 473000， China

【Abstract】Objective To compare the content of omeprazole under differences chromatographic conditions for HPLC between two different methods. Methods The C18-methanol system and C8-acetonitrile system were established， and then used the systems to determinate the contents of omeprazole from 3 different manufacturers. Results The content determination of omeprazole from three different manufacturers were determined by C18-methanol methanol and C8-acetonitrile system. There were no significant differences between them（P>0.05）. Conclusion The two kinds of different chromatographic conditions for determining omeprazole have no significant difference.

【Key words】 Omeprazole， HPLC， Determination

奥美拉唑为《中国药典》2010版收载的药品，属于第一代质子泵抑制剂，具有良好的抑制胃酸分泌的作用，临床上主要用于治疗胃溃疡、十二指肠溃疡、应激性溃疡、反流性食管炎和胃泌素瘤等疾病。药理学上关于奥美拉唑的测定方法主要是高效液相色谱法（HPLC法） ［1］，然而，目前关于不同色谱条件下测定的奥美拉唑含量是否相同的研究报道较少。因此，本研究通过比较不同色谱条件下测定奥美拉唑含量的变化，探讨不同色谱条件对测定结果的影响。5 μm）；流动相：甲醇-水-磷酸-三乙胺（160:40:0.12:0.3）；流速：0.8 ml/min；检测波长：320 nm；柱温为室温，迸样量20 μl。

2.1.2　C 8-乙腈体系 色谱柱：TIANHERC 8柱（200 min×46 mm，5 μm）；流动相：0.01 mol/LNa 2HP0 4-乙腈（65:35），用稀磷酸调pH至7.8；流速：0.8 ml/min；检测波长：320 nm；柱温为室温，迸样量20 μl。

2.2　对照品溶液的制备

精密称取奥美拉唑对照品20 mg，置于100 ml量瓶中，加甲醇稀释定容，摇匀，得到奥美拉唑储备液200 μg/ml。量取储备液l ml加入10 ml量瓶中，分别在2个体系下加流动相稀释至刻度，得到对照品溶液20 μg/ml。

2.3　供试品溶液制备

精密称取奥美拉唑肠溶片，研细称取适量加入50 ml量瓶中，用流动相超声10 min溶解，稀释至刻度，取适量3 000 r/min离心5 min，取上清液5 ml置于10 ml量瓶中定容备用。

2.4　标准曲线的制备

分别精密吸取混合对照品溶液1、2、4、10、15 μl，注入液相色谱仪中，测定两种对照品的色谱峰面积。纵坐标Y为峰面积，横坐标X为含量，绘制标准曲线，结果表明进样量与峰面积呈良好的直线性关系。

2.5　稳定性试验

取各供试品溶液，分别于配制后0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、

1　实验仪器与试剂

1.1　实验仪器

Agilent高效液相色谱仪，CX-250型超声波清洗仪器，Spectra Focus紫外检测器，输液泵，Anstar色谱工作站，BS30110型电子天平。

1.2　试剂

奥美拉唑对照品（海口奇力制药有限公司提供，批号：1050618）。厂家甲：奥美拉唑肠溶胶囊（阿斯利康制药有限公司，每粒20 mg，10950086）。厂家乙：奥美拉唑肠溶片（辰欣药业股份有限公司，每片20 mg，20083815）。厂家丙：奥美拉唑肠溶片（哈药集团三精制药诺捷有限责任公司，每片20 mg，20059393）。甲醇和乙腈为色谱纯，其余试剂为分析纯。

2　方法

2.1　色谱条件

2.1.1　C 18-甲醇体系 色谱柱：TIANHERC 18柱（200 min×4.6 mm，8.0、10.0、12.0 小时，按样品含量测定各对照品含量。

2.6　测定方法

分别在两种色谱条件下，将配制好的供试品溶液，分别测定3批，在上述两种色谱条件测定，计算RSD，对结果进行统计学分析，比较两种分析方法是否存在显著性差异。

2.7　统计学方法

采用SPSS 17.0统计软件包进行统计分析，不同色谱条件下奥美拉唑含量测定结果比较采用t检验， P＜0.05为差异有统计学意义。

3　结果

3.1　稳定性测定

2种不同方法体系下分别于0.5、1.0、1.5、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0后进样，C 18-甲醇体系和C 8-乙腈体系下RSD分别为1.08%、1.11%，表明在两种不同体系下，奥美拉唑溶液24 h内均稳定。

3.2　不同色谱条件下奥美拉唑含量测定结果比较

C 18-甲醇体系（厂家甲95.24/93.31，厂家乙105.22/106.57，厂家丙108.19/107.64）与C 8-乙腈体系（厂家甲96.17/ 94.28，厂家乙106.37/104.98，厂家丙108.13/106.94）在测定三家不同厂家奥美拉唑的含量，经过t检验，差异均无统计学意义（ P＞0.05）.

4　讨论

目前，《中国药典)和国家药品监督管理局《新药转正标准》中关于奥美拉唑的测定方法分别为C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系。另外，也有研究结合试剂的毒性和试验成本等问题二确定C 8-甲醇体系。王旭等人 ［2］研究结果表明，采用C 18-甲醇体系、C 8-乙腈体系与C 8-甲醇体系测定奥美拉唑含量，结果显示三种方法测定奥美拉唑的含量差异无统计学意义。本研究结果表明，C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系在测定三家不同厂家奥美拉唑的含量，经过t检验，差异均无统计学意义（ P＞0.05），与上述研究结果一致。在进行制剂含量测定试验时，相同厂家同一批号的奥美拉唑制剂在C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系中的测定结果也是一致的，无显著性差异，表明C 18-甲醇体系与C 8-乙腈体系下测定奥美拉唑无显著性差异。而对于不同厂家上述两种方法测定奥美拉唑的含量略有不同，但无统计学差异。本研究中甲厂家的含量测定结果稍低于乙、丙两厂家，可能由于不同厂家使用药物原料药来源不同，也可能与生产过程中使用的辅料、配方、生产工艺等因素存在差异有关。