褐飞虱ABCG基因的克隆与表达分析

闸雯俊，王芳芳，李三和，胡刚，陈志军，刘凯，周雷，杨国才，游艾青

摘要：三磷酸腺苷结合盒转运蛋白（ATP-binding cassette， ABC）广泛分布于各种生物体中，是最大的膜蛋白家族之一。在昆虫中，ABC转运子不仅在分子转运过程中有重要的功能，同时在杀虫剂抗性、代谢和发育中都起到重要的作用。克隆和鉴定了褐飞虱（Nilaparvata lugens St？覽l， BPH）ABCG基因 （NlABCG），结果表明NlABCG基因全长1 222 bp， 含有一个长度为789 bp的开放阅读框，编码263个氨基酸。NlABCG蛋白与内华达古白蚁（Zootermopsis nevadensis） ABCG的同源性最高，达到69%。利用qRT-PCR 检测NlABCG基因在褐飞虱不同发育阶段和不同组织中的表达，发现NlABCG 转录本在褐飞虱的所有发育阶段都有表达，在1龄若虫中表达量最低，随着生长发育表达量逐渐升高。NlABCG在褐飞虱5龄若虫的中肠中表达量最高。NlABCG基因的序列特征和表达谱非常保守，为其功能的分析提供了信息。

关键词：褐飞虱（Nilaparvata lugens St？覽l， BPH）;NlABCG;克隆

中图分类号：S435        文献标识码：A        文章编号：0439-8114（2014）23-5871-04

DOI：10.14088/j.cnki.issn 0439-8114.2014.23.064

ABC 转运蛋白最早发现于细菌，是细菌质膜上的一种具有运输功能的 ATP 酶（Transport ATPase），是一个庞大而多样化的蛋白家族。ABC转运蛋白是膜整合蛋白，它通过利用 ATP 水解过程释放的能量对溶质中各种生物分子进行跨膜转运，其转运的底物包括糖、氨基酸、金属离子、多肽、蛋白质、细胞代谢产物和药物等[1]。ABC 转运蛋白在生物体内以全分子或半分子转运蛋白的形式存在，全分子转运蛋白由2个核苷酸结合域（Nucleotide  bindingdomain，NBD）和2个跨膜结构域（Transmembrane domain，TMD）构成，每个半分子转运蛋白包括1个NBD和1个TMD，NBD位于细胞质内，在 NBD内有一个约200个氨基酸构成的保守序列，包含了3个保……