青黛单次给药胃肠毒性研究

石娅萍，蒋淼，闵志强

青黛单次给药胃肠毒性研究

石娅萍，蒋淼，闵志强

目的：考察青黛是否具有胃肠毒性。方法：观察单次给予青黛对正常小鼠肠推进，胃排空及排便的影响。结果：1g．kg-1青黛（相当于临床剂量20倍），可促进正常小鼠的肠推进及排便(P ＜0.05， P ＜0.01)，对小鼠胃排空有促进趋势，但无统计学意义(p＞0.05)。结论：青黛可能存在一定的胃肠毒性，但具体机理未知，还需进一步试验验证。

青黛；胃肠毒性；单次给药

青黛是一味具有良好药效作用的常用中药，但随着青黛在临床上的广泛应用，一些复方青黛制剂不良反应报告有所增加[1～5]。这些不良反应主要表现为胃肠道反应，但未发现单独报道青黛胃肠不良反应的有关文献，因此以上不良反应是否为青黛造成存在疑问。本研究拟通过对小鼠胃肠道功能影响试验，模拟青黛临床短期给药，观察青黛可能引起的临床不良反应，尤其是对消化道的影响，为说明青黛是否具有胃肠毒性提供理论依据，指导临床安全用药。

1 材料和方法

1.1 试药

青黛饮片，四川江油恒源药业提供，批号120301；生大黄饮片，购自成都百信药业。苦味酸，规格：25g/瓶，批号：20130501，台山市众诚化工有限公司。中性红，规格：25g/瓶，批号：20100914，天津市瑞金特化学品有限公司。医用活性炭，规格：500g/包，批号：20130622，重庆北碚精细化工厂。阿拉伯胶，规格：250g/瓶，批号：20130122，成都科龙化工试剂厂。葡聚糖蓝-2000，规格： 5g/瓶，CAS：87915-38-6，Amresco。

1.2 动物

KM小鼠，Ⅰ级，150只，体重18～22 g，雌雄各半。来源：成都达硕生物科技有限公司。生产许可证号：SCXK（川）2013-24。合格证号：NO.0016230。

1.3 仪器

余姚金诺TU10001B型电子天平（d=0.1g），余姚市金诺天平仪器有限公司；德国Sartorius BS124S型电子天平，德国Sartorius股份有限公司。紫外分光光度仪。

1.4 实验药液的制备

青黛药液：试验时用纯化水配制成所需浓度的混悬液，每次给药前摇匀后使用。

大黄药液：取生大黄加3倍量的冷水，浸泡20min，加热煎煮15min，趁热滤过，滤液减压浓缩至含生药1g．mL-1[6]。

2 方法与结果

2.1 分组及给药

每个实验KM小鼠50只，雌雄各半，体重18～22g，按体重随机分为正常对照组、大黄组、青黛高、中、低剂量组，共5组，每组10只。青黛组小鼠单次灌胃给予青黛饮片混悬液(10mL．kg-1)，给药前禁食不禁水24h，以1g．kg-1剂量作为高剂量，相当于临床倍数20倍，中、低剂量分别为0.5、0.25g．kg-1，分别相当于10、5倍临床人用剂量。大黄组小鼠同法给予大黄药液，剂量10g．kg-1[6]，相当于临床倍数=40倍。正常对照组给予等体积纯化水(10ml．kg-1)。

2.2 青黛对正常小鼠肠推进功能影响

灌胃给予受试物，给药前禁食不禁水24h以上,给药40min后各组均按20ml/ kg的剂量给予炭末混悬液，20 min后颈椎脱臼处死动物，立即剖开腹腔，测量肠管长度及炭末推进长度，计算炭末推进率：炭末推进率(%)= [炭末推进长度(cm)/小肠总长度(cm)]×100%。结果见表1。

表1 青黛饮片对正常小鼠肠推进功能的影响试验结果(±sD)

表1 青黛饮片对正常小鼠肠推进功能的影响试验结果(±sD)

注：各给药组与对照组比较 * p＜0.05 ** p＜0.01

组 别 炭末推进率(%)正常对照组 67.19±11.12大黄组 82.30±8.85**青黛高剂量组 77.75±8.19*青黛中剂量组 74.10±6.07青黛低剂量组 69.26±9.93

表1显示，10g．kg-1生大黄饮片能促进小鼠肠炭末推进率(p＜0.05)，表明试验方法可信。 1g．kg-1青黛饮片能促进小鼠肠炭末推进率(p＜0.05)，有促进肠推进作用。0.5g．kg-1青黛饮片也能促进小鼠肠炭末推进率，但无统计学意义(p＞0.05)。

2.3 青黛对正常小鼠排便功能影响

灌胃给予受试物，给药前禁食不禁水24h以上，给药40min后各组均按0.5ml/只给予炭末混悬液。各鼠分置于铺有滤纸的烧杯内进行观察，记录小鼠排黑便的时间、粪便性状和数目，以及粪便沾染肛门情况。结果见表2。

表2 青黛饮片对正常小鼠排便功能的影响试验结果(±sD)

表2 青黛饮片对正常小鼠排便功能的影响试验结果(±sD)

注：各给药组与对照组比较 * p＜0．05 ** p＜0．01

组 别 首次排黑便时间(min) 6h排便数(次)正常对照组 236.3±31.2 3.7±1.4大黄组 185.0±35.8** 8.7±3.4**青黛高剂量组 209.8±37.8 6.1±2.2**青黛中剂量组 211.6±31.3 3.8±1.6青黛低剂量组 239.6±41.7 4.1±2.4

生大黄饮片灌胃给药3h后小鼠在首次排便，6h观察期内排便数显著增加(p＜0.01)，同时观察发现小鼠均出现稀便，符合生大黄泻下功效，表明试验方法可信。1g．kg-1青黛饮片能增加小鼠排便次数(p＜0.01)，但对排便时间无显著影响(p＞0.05)，同时观察发现个别小鼠出现稀便，表明该剂量有一定促进排便作用。0.5g．kg-1及0.25g．kg-1剂量组对小鼠排便次数及排便时间均未造成影响(p＞0.05)。

2.4 青黛对正常小鼠胃排空功能影响

灌胃给予受试物，给药前禁食不禁水24 h以上，给药1 h后，每只动物灌入2%葡聚糖蓝-2000溶液0.4mL，20 min后颈椎脱臼处死动物，立即剖开腹腔仰卧固定，开腹，自幽门括约肌处取胃，沿大弯侧剪开，将胃内色素残留物充分洗于5 mL超纯水中，3500 rpm离心15 min，取上清液，在分光光度仪上620 nm测吸光度(A)为胃内色素残留量。胃内色素残留率=胃内残留色素吸光度/标准管胃内色素吸光度×100%。结果见表3。

表3 青黛饮片对正常小鼠胃排空功能的影响试验结果(±sD)

表3 青黛饮片对正常小鼠胃排空功能的影响试验结果(±sD)

注：各给药组与对照组比较 * p＜0.05

组 别 胃残留率(%)正常对照组 51.10±13.17大黄组 34.96±19.36*青黛高剂量组 38.91±22.16青黛中剂量组 46.52±26.74青黛低剂量组 42.80±21.32

生大黄饮片给药后能促进小鼠胃排空(p＜0.05)。从数值上看，各剂量青黛饮片能降低小鼠胃残留率，但无统计学意义(p＞0.05)。

3 讨论

针对青黛在临床上暴露出的一系列胃肠道毒性反应特征，本次试验设计了与胃肠道功能密切相关的肠推进，胃排空及排便这三个指标进行考察，观察青黛是否具有胃肠毒性。试验结果证明青黛对胃肠道功能有一定影响，特别是1g/kg青黛（相当于临床剂量20倍），可促进小鼠的肠推进及排便功能，其余数据也表明在1g/kg剂量以下，也可能存在胃肠道毒性反应。在下一步还将进行多次给药试验，结合两次结果，以期初步确定青黛是否具有胃肠道毒性。

本次试验由于经费有限，未能对青黛胃肠道毒性的机理进行深入研究。分析其胃肠道毒性的原因可能与青黛药性有关，青黛为苦寒药物，中医认为苦寒伤胃，因此有些患者出现胃肠反应。按现代科学解释，可能为青黛中某种成分对胃肠道有一定刺激，但毒性成分类别及其具体机理还需进一步试验确证。青黛在传统中医中一直作为清热凉血使用，对临床使用而言，其胃肠毒性具有两面性，好的一面对一些热毒较甚，特别是兼有热结便秘的患者来说，其促进排便的副作用有助于体内热邪排除体外，起到“釜底抽薪”的副作用。而坏的一面是，若病人本身脾胃虚弱，或有胃肠道溃疡，在使用青黛时可能会诱发胃肠不良反应。

综上，本次实验发现单次给予1g/kg青黛，可促进小鼠的肠推进及排便功能，证实青黛可能存在一定的胃肠毒性，但具体机理未知，还需进一步试验验证。

[1] 李国良,梁洪彦.复方青黛丸致便血2例[J].中国农村医学, 1996,21(8):49.

[2] 张良胜.复方青黛丸引起肠道出血1例[J].皮肤病与性病, 1994,16(1):59.

[3] 范慧英,杜玉兰,栾红.复方青黛丸致胃出血3例[J].中华皮肤科杂志, 1995,28(5):328.

[4] 李思明,王道田,吴彩云.口服复方青黛丸致消化道出血9例[J].中国皮肤性病学杂志,2003,17(1):55.

[5] 陈子钦,毛碧芳.复方青黛丸引起黏液血便[J].海峡药学, 1995, 7(4):51

[6] 谭松生,周学军.生大黄煎液与生大黄粉对小鼠泻下作用的比较研究[J].湖南师范大学学报(医学版), 2009, 6(1) :60.

（责任编辑：何瑶）

Research on gastrointestinal toxicity of Qingdai after single administration

SHI Ya-ping, JIANG Miao, MIN Zhi-qiang //( School of Pharmacy, Chengdu University of Traditional Chinese Medicine; National Key Laboratory Breeding Base of Systematic Research, Development and Utilization of Chinese Medicine Resources, Chengdu 611137, Sichuan)

Objective:To investigate the gastrointestinal toxicity of Qingdai.Method:To observe the effect of Qingdai on intestinal propulsion, gastric emptying and defecation in normal mice after single administration .Result:1g/kg indigo (equivalent to 20 times of clinical dose) can promote intestinal propulsion and defecation of normal mice (P ＜0.05 or P ＜0.01). A tendency of promotion of gastric emptying can be observed with no statistical signifcance (p＞0.05).Conclusion:Qingdai may have certain gastrointestinal toxicity, but the mechanism is unknown which need further experimental verifcation.

Qingdai; gastrointestinal toxicity; single administration

R285.5

A

1674-926X(2015)04-004-02

成都中医药大学校基金项目：青黛胃肠道毒性研究（编号：ZRMS201333）

成都中医药大学药学院 四川省中药资源系统研究与开发利用重点实验室—省部共建国家重点实验室培育基地，四川 成都 611137

石娅萍（1978-），女，讲师，博士，主要从事中药安全性评价研究Tel:18982260169 Email:stone78520@163.com

闵志强（1979-），男，讲师，博士，主要从事中药药性理论与临床应用研究Tel:13880641950 Email:minzq@qq.com

2015-03-30