大鼠及小鼠灌胃给药操作方法探讨

2015-02-23 14:39戴支凯
现代医药卫生 2015年11期
关键词:操作者灌胃药理学

戴支凯

(桂林医学院药理学教研室,广西桂林541004)

大鼠及小鼠灌胃给药操作方法探讨

戴支凯

(桂林医学院药理学教研室,广西桂林541004)

灌胃给药是大、小鼠最常用的给药方式之一。作者在实验教学工作中注意到不同操作者灌胃给药操作手法存在差异,有的操作者灌胃给药不顺畅、耗时长,甚至有误入气管导致动物死亡的现象。如何规范化进行大、小鼠灌胃给药操作是值得包括本科生、研究生、教师和科研人员在内的广大医药科研人员思考的问题。结合作者个人长期科研和教学经验,将大、小鼠灌胃给药操作方法总结为抓取提尾巴、固定头背尾、头高尾低位、口角侧插入、胃管摆正位、插管需观察、先慢后快推等步骤。以期与同行共勉,为初学者提供参考。

大鼠; 小鼠; 投药,口服; 动物实验; 教学

大、小鼠是医药学实验教学和科研常用啮齿类动物。灌胃给药是啮齿类动物最常用的给药方式之一。如何规范化进行大、小鼠灌胃给药操作,以保障药物能准确、无误地进入大、小鼠胃内,不影响动物的生理功能[1],并尽可能地减少对动物的刺激、避免损伤动物和药物误入气管导致动物死亡是值得广大医药学教师(尤其是药理学、中药药理学教师)和科研人员思考的问题。

目前,有关大鼠[2-6]及小鼠[2-3,7]灌胃给药操作方法的描述和网络视频并不少见,但尚缺乏规范化、标准化的操作方案。作者有幸参加了一次全国药学专业学生的技能操作竞赛,发现许多院校学生在灌胃给药操作过程中存在操作手法等方面的差异(如单手捉拿动物和双手捉拿动物),不少学生在操作中存在许多问题。作者认为,大、小鼠灌胃给药操作应形成一个规范化方案。在大、小鼠灌胃操作过程中应至少弄清4个方面的问题,即每一步操作的目的是什么、每一步操作有哪些可行的操作方法、每一步操作的操作方法选择的原因和哪种操作方法最优。为此,作者进行了大、小鼠灌胃给药操作方法的初步探讨和小结,以期与同行共勉,为初学者提供参考。

1 大、小鼠灌胃给药操作的目的

任何技能操作前必须确定具体、明确的操作目标,只有这样才能做到有的放矢。众所周知,大、小鼠灌胃给药操作的最终目的是将一定量的药物准确注入动物胃内;同时,应尽可能地减少对动物的刺激,避免操作造成动物局部损伤和药物误入气管引起动物死亡,以利于实验或科研工作的顺利进行[5]。因此,在大、小鼠灌胃过程中所有操作环节的思考和实施必须围绕该目标进行。

2 大、小鼠灌胃给药操作步骤分解

大、小鼠灌胃操作方法基本相同。常用于科研的大鼠体质量为小鼠的10倍左右,大、小鼠灌胃的主要区别点:(1)小鼠体型较小,且性情较温顺,较容易抓取和固定;大鼠体型相对较大,易激怒,且其肌肉力量相对较大,在动物抓取和固定时操作者操作大鼠所需用的力量和操作难度大于小鼠。(2)小鼠一般不会咬人,而大鼠易被激怒、凶猛(攻击性强、对操作者伤害性大)。因此,捉拿和固定大鼠时常需戴帆布手套;而对小鼠的操作可不戴手套(或戴一次性手套)。(3)由于大、小鼠存在体型大小的差异,故大鼠使用的灌胃管一般比小鼠使用的灌胃管粗、长。(4)大鼠胃容量大于小鼠,因此,灌胃的药物体积不同。(5)大鼠灌胃给药的体积通常是以mL/100g体质量为单位设计的,而小鼠则是以mL/10g体质量设计。

根据长期的实验教学经验,作者将大、小鼠灌胃操作分解为既相互独立、又相互影响[8]的五大环节,即动物的捉拿、固定、体位摆放,以及灌胃管的插入与动物反应的观察、药物的推注等。各实践环节应做到目标明确,操作正确、科学,否则难以达到最终目的。因此,每一步操作方法的选择均必须有其选择依据或操作理由,否则该操作方法就可能是有缺陷的,甚至可能是错误的。

3 大、小鼠灌胃给药操作方法的选择及其原因

3.1 动物的捉拿 动物捉拿的核心目标是取出实验动物、尽可能避免刺激动物,并保证操作者安全。大、小鼠尾巴较长,易于抓取,且动物尾部对外界刺激的反应性和敏感性相对较低,因此,通过抓取尾巴捉拿大、小鼠对动物的刺激最小。在学生教学实验中发现,有学生在捉拿动物时抓动物的尾端,并将动物向后拉着提起动物,当动物抓住粗糙面时易出现动物尾部皮肤脱落的现象。为此,作者认为:(1)为避免所抓动物尾部皮肤脱落,抓动物尾巴的部位不宜太靠近尾端;(2)为减小动物对粗糙面的抓力,提起动物时宜朝着动物头侧向上提起尾巴;(3)为保证操作者的卫生和安全,抓小鼠时最好戴一次性手套,抓大鼠时最好戴帆布手套。

3.2 动物的固定 固定大、小鼠的目的主要是避免动物对操作者造成伤害;同时,便于操作者的灌胃操作。动物对操作者的主要威胁来自两方面,即动物对操作者的咬伤和抓伤。因此,动物的固定应做好以下三方面的操作:(1)动物头部的固定。视操作者用手习惯,用一只手(如右手)抓住动物尾巴、提起动物,然后,将动物放在粗糙面上,并用一定的力度将动物向后拉紧;动物四爪抓住粗糙面不放时用另一只手(如左手)的大拇指和示指抓住动物双耳及耳间局部皮肤,使动物头部不能转动,从而固定头部,这样可避免动物的咬伤。(2)动物躯干部位的固定。通过移动右手,使小鼠或大鼠背部分别靠紧左手指或手掌,用左手中指和无名指将动物背部皮肤压在手指或手掌上,使动物背部皮肤拉紧、四肢活动受限。(3)固定动物尾巴。用左手小指将动物尾根部压住,从而减少动物尾巴的摆动,以免动物尾巴上的污物(如动物的粪便、尿液)因动物甩尾而溅到操作者身上,这样可确保操作者的卫生。

3.3 动物体位的摆放 大、小鼠灌胃操作是应用与注射器连接的灌胃器将药物定量地送入动物胃内,通常的灌胃器是应用特制的12~16号注射针、麻醉针等制作而成,分为与注射器连接的柄部和插入动物体内的管部。根据操作者习惯,灌胃器的管部可制作成适度的弧状,以适应动物的生理解剖结构,但亦可保留直线状。不论是应用弧状灌胃器,还是直线状灌胃器,在固定动物时通过左手大拇指和示指的移动,应使动物头部和躯干保持在一条直线上[4,8-9]。由于重力作用动物在体位摆放时应通过肘关节和腕关节的活动使动物处于头高尾低的体位,以便于灌胃插管与给药;反之,若采用头低尾高位,灌胃管拔出时会有药物流出,从而影响给药的准确性。

3.4 灌胃管的插入与动物反应的观察 在大、小鼠灌胃管插入过程中尽量减少对动物的刺激和避免损伤动物口腔、咽部与食管黏膜是操作者应遵循的基本原则,亦是实验动物伦理的基本要求。灌胃管的插入过程:将灌胃管末端从大、小鼠嘴角进针,在灌胃管末端触到动物硬腭后将灌胃管摆正到动物躯干中线,缓慢沿着动物食管插入胃内。在灌胃管插入过程中应感觉到无阻力[8];同时,观察动物反应[9],如果中途动物出现剧烈挣扎则表明灌胃管很可能进入气管,此时需将灌胃管拔出后重新再插。此外,灌胃管插入过程中操作者应始终能看到注射器的刻度,以便按需推注药物。至于灌胃管插入深度可根据解剖结构,插管前可用灌胃管在动物体外比试进行确定。

3.5 药物的推注 关于大、小鼠灌胃的药物推注多数操作者一般没有太多困难。但作者认为,安全的方法应做到先慢后快。先缓慢推注是为防止极少数动物对灌胃管插入气管不敏感,缓慢推注时便于进一步观察动物反应;如动物无反应则可快速推注完余药;如动物出现剧烈反应则提示存在灌胃管插入气管的可能,此时需迅速拔出灌胃管,将动物体位立即变为头低尾高位,必要时可利用惯性作用将可能进入气管内的药物甩出,这样可尽可能避免因误插气管导致动物死亡。

总之,大、小鼠灌胃操作是常用动物给药的基本技能,应用动物进行科研者必须熟练掌握正确的操作方法。为此,作者将大、小鼠灌胃操作方法总结为抓取提尾巴、固定头背尾、头高尾低位、口角侧插入、胃管摆正位、插管需观察、先慢后快推等步骤。当然,在熟练掌握大、小鼠灌胃操作的基本方法后也可简化其中的部分操作,如关于大鼠的固定在实际操作时只需用大拇指和示指抓住大鼠双耳及其间的皮肤,然后,用手掌顶住大鼠前肢背部,即可进行灌胃管的插入及药物推注,且动物受到的刺激更小;小鼠的捉拿和固定亦可单手操作进行;灌胃管进入食道(不必进入胃内)后就可推注药物[9]等。因此,本方法可能更适用于初学者。

[1]鄢海燕,邹纯才,杨洋,等.小鼠最大灌胃量的研究[J].中国当代医药,2015,22(2):4-6.

[2]赵明德.常用小型实验动物灌胃给药技术方法介绍[J].泸州医学院学报,2004,27(3):258-259.

[3]魏玉.几种实验动物灌胃给药方法简介[J].上海实验动物科学,2003,23(3):180.

[4]冯雪建,卢占军,高登慧.大鼠灌胃给药方法的研究[J].实验动物科学与管理,2006,23(4):53-55.

[5]吴翠萍,李彦,卜文,等.哺乳期大鼠灌胃给药技术方法探讨[J].中国药理学与毒理学杂志,2013,27(3):540.

[6]范志刚,于晓凤,张芙翠,等.乳大鼠灌胃给药方法之改进[J].中国药理学通报,1994,10(6):470-471.

[7]王宁萍,赵建宁,杨志伟.一种改进的小白鼠灌胃给药法[J].宁夏医学院学报,1999,21(1):57-58.

[8]方远书,何忠平,裘颖儿.实验小鼠的灌胃给药技巧[J].山东畜牧兽医,2014,35(10):90.

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.11.057

:B

:1009-5519(2015)11-1738-03

2015-02-16)

戴支凯(1971-),男,湖北天门人,教授,主要从事药理学教学及科研工作;E-mail:dzhk110@126.com。

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