溶血磷脂酸预处理提高心肌梗死区移植干细胞存活的实验研究

侯剑峰，刘学彬，丛祥凤，胡盛寿，陈 曦

·基础研究·

溶血磷脂酸预处理提高心肌梗死区移植干细胞存活的实验研究

侯剑峰，刘学彬，丛祥凤，胡盛寿，陈 曦

目的探讨溶血磷脂酸（LPA）预处理对心肌梗死后间充质干细胞（MSCs）移植早期存活率的影响。方法MSCs取自雄性SD大鼠，缺氧无血清条件下LPA预处理MSCs，ELISA法测定培养液中血管内皮生长因子（VEGF）含量。冠状动脉结扎法制作雄性SD大鼠心肌梗死（MI）模型。3周后，经超声筛选合格MI大鼠随机分为3组：① 培养基（DMEM）注射组：心肌梗死区细胞培养基注射（n＝24）；②MSCs组：心肌梗死区雄性MSCs注射（n＝26）；③L－MSCs组（n＝27）：心肌梗死区LPA预处理的雄性MSCs注射组，细胞注射量为2×106。Real time－PCR技术检测SRY基因（Y染色体），TUNEL的方法评价移植细胞凋亡，免疫组化检测毛细血管密度，超声心动图评价心功能。结果LPA预处理显著提高了缺氧无血清条件下MSCs的VEGF分泌；与单独MSC移植相比，LPA预处理显著提高了移植MSCs存活率［1 h：（50．93±11．43）%vs．（23．63±2．24）%，P＝0．28；1 d：（34．96±12．1）%vs．（14．75±1）%，P＝0．31；1周：（1．38±0．35）%vs．（0．69±0．14）%，P＝0．44］；减少了移植MSCs凋亡，同时促进了局部毛细血管的新生，但没有获得心功能的显著改善。结论LPA预处理能够提高移植MSCs存活，增强其旁分泌作用，促进血管的发生，是一种有效地提高MSCs移植存活的策略。

溶血磷脂酸；干细胞移植；存活；凋亡；心肌梗死；大鼠

1 资料与方法

1．1 实验动物与方法 实验动物为SPF级Sprague－Dawley（SD）大鼠，均由北京市维通利华实验动物技术有限公司提供，6～8周龄，体重260～280 g。MSCs取自雄性SD大鼠，缺氧无血清条件下LPA预处理第3代MSCs，移植前4＇，6－二脒基－2－苯基吲哚盐酸（4’，6－diamidino－2’－phe－nylindole，DAPI）标记。采用冠状动脉结扎法建立心肌梗死模型；3周后，使用超声心动图筛选……