山羊绒DNA的提取及验证

王玫+任亮+孔平+颜怀玉+肇慧君+杨春光

摘要

提取DNA是利用PCR技术检测纤维的关键技术难点。本文对山羊绒DNA的提取方法进行了试验，并通过PCR扩增的方法进行验证。结果表明：使用TaKaRa MiniBEST Universal Genomic DNA Extraction Kit Ver.5.0 试剂盒，将纤维样品尽量处理成粉末状，并在样品经裂解液处理后先离心除去其中尚未完全溶解的纤维，然后进行PCR扩增是比较有利的，完全能够得到满足PCR扩增要求的DNA样品。

关键词：山羊绒;DNA;提取方法;验证

山羊绒是一种珍贵的动物纤维，山羊绒的价格比绵羊毛、马海毛的价格高出很多倍，一些商家为了牟取利益，将细支绵羊毛、马海毛等混纺产品冠以“纯羊绒”的桂冠，使消费者上当[1]。目前羊绒羊毛纤维普遍采用的鉴别方法是投影仪法、扫描电镜法，其原理为通过纤维的外观形态、微观结构辨别纤维种类，由于主观因素大，准确率不高[2]。利用PCR技术鉴别动物纤维是近年来的研究热点，而DNA的提取是利用PCR技术检测纤维的关键技术难点。

毛发中的DNA主要集中在毛囊细胞中，毛干部分仅含有少量线粒体DNA[3]。在从动物体上采集或脱落的毛发中，绝大多数都带有完整的毛囊[4]。王庆林等研究表明从被毛毛囊细胞中提取DNA的最大缺点是获得的DNA量非常少，如操作不慎，就有可能提取不到DNA[5]。毛干相对于毛囊，其DNA含量更少，几乎所有成分都是角蛋白，但作为动物组织，毛干具有细胞结构，如果提取方法得当仍可以获得一定量的DNA[6]。吴云良通过对细胞的煮沸和冷却，使细胞破裂、蛋白质变性，从而获得用于PCR扩增的模板DNA的法为提取东北虎毛发中DNA[7]。……