卵黄抗体三种提取方法的比较研究

张莹辉，吴思捷，薛麒，梁琦，姚文生，*

(1中国兽医药品监察所，北京100081；2中国农业大学动物医学院，北京100193)



卵黄抗体三种提取方法的比较研究

张莹辉1，吴思捷1，薛麒1，梁琦2，姚文生1，*

(1中国兽医药品监察所，北京100081；2中国农业大学动物医学院，北京100193)

运用硫酸铵法、聚乙二醇(PEG)法、冷乙醇法对卵黄抗体进行提取，并使用间接竞争酶联免疫吸附试验(ELISA)方法测定所得卵黄抗体的特异性，用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)测其纯度，用Nanodrop2000测其蛋白浓度并计算提取量，比较三种方法所得抗体的特异性、纯度和提取量。结果显示，三种提取方法所得卵黄抗体特异性高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法；纯度高低依次为硫酸铵法、冷乙醇法、PEG法；三种方法的提取量高低依次为PEG法、硫酸铵法、冷乙醇法。经综合分析与评价，硫酸铵法的抗体特异性较好、纯度较高、提取量也较高，且其操作方法相对简便，是比较具有优势的提取方法。

卵黄抗体；提取；硫酸铵法；聚乙二醇法；冷乙醇法

卵黄抗体(Egg yolk antibodies，IgY)是指免疫后禽类卵黄中存在的抗体，是由禽类血液中的特异性抗体

(IgG、IgA、IgM等)转移至卵黄中对子代产生保护性作用的抗体[1]。IgY具有稳定、安全、高效、无毒副作用等优点[2]，主要用于兽药产品、免疫检测、生化检测、人类保健品、化妆品等方面[3]。常用的卵黄抗体提取方法包括有机物沉淀法、有机溶剂沉淀法、水稀释法、超临界气体提取法、去污剂分离法等，不同提取方法各有其优缺点[4]。本研究以沃尼妙林为模式药物，筛选成本较低且操作相对简便的硫酸铵法、PEG法、冷乙醇法等三种提取卵黄抗体方法进行比较研究，综合比较其优缺点，以期为今后工业化生产提供依据。……