兽医临床样品的采集与送检规范

樊丽鑫 袁 慧 宋红静 （河南省西峡县动物卫生监督所 474500）

兽医临床样品的采集与送检规范

樊丽鑫 袁 慧 宋红静 （河南省西峡县动物卫生监督所 474500）

当前畜禽养殖场疾病流行性情况复杂，混合感染和继发感染相当普遍，临床症状和病理变化呈非典型化趋势，兽医实验室检测对于畜禽疫病诊断显得极为重要。同时，兽医人员对畜禽养殖场实施定期疫病和免疫水平监测，是减少畜禽疫病发生、流行和蔓延，降低经济损失，确保畜牧业又好又快、持续健康发展的必要手段。

兽医临床样品的采集和送检是保证兽医实验室各项检测结果可靠性和准确性的前提和基础，兽医临床样品送检过程中的规范性也直接关系到兽医实验室各项检测结果的可靠性和准确性。下面就兽医临床样品的采集，保存和送检方法做简要介绍：

1　样品采集的一般原则

（1）凡发现患病畜禽有急性死亡时，如怀疑是炭疽，则不可随意解剖，应采取患病畜禽的血液，万不得已时做脾脏触片的显微镜检查，只有在排除炭疽后方可进行剖检，如怀疑是口蹄疫或高致病性禽流感等一类病原感染，则应送相关参考实验室进行确诊。（2）用于病理学监测的样品，要求所取组织新鲜，并及时固定。动物最好尚未死亡或死亡不久，剖检时要观察有肿瘤增生的脏器（肝、脾为必取组织），在病变和正常组织交界处取材，所取组织块不要太大，厚度不超过1cm，并立即浸入10%福尔马林固定液中保存，固定液不宜过少，固定液与组织比例为10：1以上。（3）采集病料的种类，应根据畜禽种类和各种传染病的特点采集相应的脏器、分泌物或排泄物。无法怀疑是什么传染病时，应全面采取。（4）血液样品采集后，可暂时放置于40C冰箱保存，避免冻融溶血，分离出的血清可放置-200C保存。病死畜禽应及时采集样品，防止温度过高引起腐败。（5）样品采集时，应尽量保持采样过程处于洁净环境，以防止样品在采集过程中污染其他病原，干扰样品的诊断检测结果。（6）畜禽养殖场发生疫病后，应详尽收集发病时间、发病动物数、同群动物数、死亡数、临床治疗情况、同群动物免疫情况等，以书面材料（填写送检表格）会同送检样品送达兽医诊断实验室。（7）样品采集时应做好个人防护，防止人畜共患病的感染。样品采集完毕后应及时清理现场，做好环境消毒和尸体的无害化处理。

2　样品的采集步骤

（1）选择临床症状典型、能代表整个畜禽发病特点的病畜禽2～3头（只）以上进行解剖。（2）解剖后采取病变典型组织送检，以淋巴结、扁桃体、肺脏、肾脾、血样为主。（3）作细菌性疾病检测，送检前5～7d内应避免使用抗生素类药物。（4）做免疫监测时，应区分畜禽的生长阶段，每个阶段的群体随机抽样采取10～30份血样。（5）血样采集1～5ml以上，静置平放15～20min，充分析出血清后3～7℃冷藏保存。（6）样品的标记：①样品采集后，应在包装袋上标明样品编号，避免不同样品混淆。②送检人应认真填写“客户送样登记表”或“样品送检单”。标明送检单位信息，如养殖场名称、送检人姓名、动物品种、日龄及数量等，还应填写清楚动物临床表现情况，如发病率、死亡率、临床表现、病理变化、免疫程序和用药情况等。将登记纸张与病料一同送至实验室。填写注意事项：联系方式应填写准确、详尽，实验室将建立客户信息档案，以方便客户进行回溯性追踪检测结果；表格中填写的样品数量与样品编号应与送检的样品数量和编号一致，且样品尽可能使用唯一性编号，以防止样品混淆；检测项目一栏为送检人根据临床情况和剖检情况进行有针对性的检测要求，兽医实验室也可根据临床情况描述或剖检情况向客户推荐合适的检测项目；表格填写完整后，可随样品一起送至兽医实验室，也可通过电子邮件的方式发送至兽医实验室邮箱；临床剖检时，应尽量拍照记录剖检时的组织脏器病理变化，剖检照片可发送电子版表格至兽医实验室电子邮箱，以辅助诊断分析。

3　临床样品的采集

3.1全血样品的采集 猪自耳静脉或前腔静脉，家禽自翅静脉，其他家畜自颈静脉采血。用注射器吸5%枸橼酸钠溶液0.5～1ml（0.1ml的枸橼酸钠溶液溶液可抗1ml血液），注入灭菌离心管中。无菌采血5～10ml加入离心管混匀，盖紧离心管盖，做好标记。

3.2血清样品的采集 猪自耳静脉或前腔静脉，家禽自翅静脉，其他家畜自颈静脉无菌采血3-5ml置无菌试管中摆成斜面，待血液充分凝固后可竖起。待血清充分析出后或离心分离血清后，用无菌注射器吸出血清注入无菌离心管中，盖紧离心管盖，做好标记。

3.3乳汁的采集 取乳者手部用新洁尔灭清洗消毒，同时对被取乳动物的乳房、乳头进行消毒，并把乳房附近的毛刷湿。弃去最初挤出的乳汁，然后采乳10～20ml注入灭菌试管或小瓶中，做好标记。

3.4浓汁、水疮液、水肿液和渗出液的采集 破口的脓灶脓汁用灭菌棉拭子蘸取后，置入灭菌离心管中，剪去露出部分，盖紧离心管盖，做好标记，并密封低温保存；未破口的脓灶用灭菌注射器吸出脓液后，注入灭菌容器中，做好标记，密封低温保存。

3.5鼻拭子、咽拭子、肛拭子的采集 用灭菌棉拭子在患病畜禽鼻腔或咽喉部、肛处转动至少3圈，蘸取分泌物后，立即放入加有1mlPBS或生理盐水的灭菌离心管中，剪去露出部分，盖紧离心管盖，做好标记，冷藏保存。

3.6淋巴结、肝、脾、肺、肾的采集 淋巴结可整个采取，其他器官可采取病变明显部位。无菌剪取一块（肝脾大至2-3cm3），分别放置灭菌容器中，另取少许病料触片数张，并做好标记，一并送检。

3.7肠的采集 选取适宜肠段约2寸以上，两端结扎，在结扎线外端剪断后，置玻璃容器或塑料袋中。

3.8胆汁的采集 采取整个胆囊置一塑料袋中或以灭菌注射器吸取胆汁数毫升注入灭菌器内。

3.9脑和脊髓的采集 将脑和脊髓取出，浸入保存液中或将头部整个割下，用浸过3%石碳酸的纱布包裹后，装入塑料袋内。

3.10小家畜、家禽的尸体和流产胎儿的采集 用消毒液浸过的纱布包裹后，装入塑料袋中整个送检。

4　样品的保存和运输

4.1样品的保存 （1）血液样品应置于3～7℃低温环境中冷藏保存，避免冻结失效。（2）活组织取出后，需置于室温中进行降温，再放入冰箱或冰盒中，不要直接放入冷冻环境。

4.2样品的运输 （1）畜禽组织样品取样后，应尽快送到兽医实验室进行检测，短时间内不能送到实验室的样品，应放置于冷冻环境后，再加足冰块，放入保温泡沫箱中运输。（2）样品运输应提前和动物疫病诊断室沟通，采用最快的途径进行运输，防止运输时间过长造成样品腐败。（3）样品运输方法：放入泡沫保温箱中运输。视气温情况和运输时间长短加入足够冰袋，最好在24h内送至实验室，越快越好，一般不超过48h。

S851.34

C

1007-1733（2015）06-0055-02