HPLC法测定清热解毒胶囊地黄中毛蕊花糖苷含量

2015-04-15 22:20何洪伟潘文波何庆武陈秋吕宜春市第二人民医院药剂科江西宜春336000
江西中医药 2015年11期
关键词:毛蕊花糖苷法测定

★ 何洪伟 潘文波 何庆武 陈秋吕 (宜春市第二人民医院药剂科 江西宜春336000)

清热解毒胶囊由石膏、金银花、玄参、地黄、连翘、栀子、甜地丁、黄芩等十余味中药材组成,具有清热解毒之功。用于治疗流感,上呼吸道感染等症,临床疗效显著[1],未发现严重不良反应,深受广大患者好评。为了更有效地控制清热解毒胶囊的质量,本研究采用高效液相色谱(HPLC)法测定清热解毒胶囊里面地黄药材中的毛蕊花糖苷的含量,从而为建立清热解毒胶囊的质量标准提供可靠依据。

1.1 实验仪器 安捷伦高效液相色谱仪(美国惠普安捷伦公司);BP211D电子分析天平(德国Sartorius公司);真空干燥箱(上海一恒实验仪器总厂);DK-S26型电动恒温水浴锅(上海精宏试验设备有限公司);TP-150超声波清洗机(天鹏电子新技术有限公司)。

1.2 药品与试剂 清热解毒胶囊(江西银涛药业有限公司;批准文号:国药准字Z20054663);甲醇、乙腈均为色谱纯;毛蕊花糖苷对照品(中国药品生物制品检定所,批号:121093-201303);水为超纯水,其余试剂为分析纯。

2 方法与结果

2.1 溶液制备及色谱条件 对照品溶液的制备:精密称取毛蕊花糖苷对照品适量,加甲醇制成每1mL含毛蕊花糖苷46.3μg的对照品溶液,滤过(微孔滤膜孔径:0.45μm),取续滤液,即为毛蕊花糖苷对照品溶液。

供试品溶液的制备:精密量取该制剂样本内容物2.00g,置50mL具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25mL,密塞,称定重量,超声处理30min,放至室温,再称定其重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密量取续滤液2mL,置25mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即为供试品溶液[2]。

色谱条件:色谱柱:Agilent Eelipse XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm);流动相:甲醇-乙腈-0.1%醋酸溶液(15∶50∶35);检测波长:334nm;流速:0.8mL/min;柱温:30℃;进样量:10μL。

2.2 标准曲线制备 精密吸取浓度为46.3μg/mL的对照品溶液2,5,10,15,20μL,分别注入高效液相色谱仪中,测定其峰面积,分别以对照品峰面积积分值为纵坐标,以进样量为横坐标,进行线性回归处理,得到回归方程为Y=2351.1X-19.153,r=0.9998。说明毛蕊花糖苷在0.0926~0.926μg范围内与峰面积呈良好的线性关系。

2.3 精密度试验 精密吸取上述对照品溶液10μL,重复进样6次,测定相应对照品峰面积积分值,结果RSD值均小于3.0%,符合要求,表明仪器、方法的精密度良好。

2.4 稳定性试验 精密吸取供试品溶液10μL,于放置0,3,6,9,12,18h时分别进样,测定其峰面积,得到供试品溶液的RSD值为1.25%,由此可知供试品在放置18h内性质稳定。

2.5 重复性试验 取同一批次的该制剂5份,依法制备供试品溶液,测定其峰面积,计算毛蕊花糖苷的RSD值为0.97%,均符合要求。

2.6 加样回收率试验 精密称取6份同批次的该制剂制成供试品溶液,分别精密加入10μL的对照品溶液,照含量测定项下处理样品溶液,依法进行加样回收率考察,结果平均回收率为99.48%,RSD为0.21%。

2.7 毛蕊花糖苷的含量测定 取3批样品分别制得供试品溶液,按上述方法进行含量测定,采用峰面积比较法计算毛蕊花糖苷含量,结果表明,本品每克含毛蕊花糖苷应不低于0.307mg。

3 结论与讨论

通过查阅总结大量文献发现提取毛蕊花糖苷的方法有索式提取法,回流提取法,超声提取法等多种方法;其中回流提取法有采用甲醇回流、10%盐酸和二氯甲烷回流等[3],本实验采用甲醇超声提取,和甲醇回流提取两种方法进行对照,结果显示两种方法提取效果想似,考虑到超声提取操作更为简单,故选择超声提取。

综上所述,本研究中所建立的HPLC法测定决明子中橙黄决明素含量操作方法简便,有良好的重复性和精密度,可为五味通心胶囊的质量控制提供有效参考。

[1]陈德金,祝晨蔯,林朝展.HPLC法测定裸花紫珠片中毛蕊花糖苷及连翘酯苷的含量[J].中成药,2011,33(3):449-452.

[2]蔡金平,董琳,盛琳,等.HPLC同时测定裸花紫珠药材中毛蕊花糖苷和木犀草素[J].中国实验方剂学杂志,2013,19(1):81-84.

[3]吴龙.反相高效液相色谱法测定地仲强骨胶囊中毛蕊花糖苷的含量[J].中南药学,2012,10(6):469-471.

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