G－CSF对东莨菪碱痴呆模型大鼠认知及ChAT表达的影响

丁 明，张 迅，王 威，迟 蕾

术后认知功能障碍 （postoperation cognitive dysfunction，POCD）是指麻醉手术后出现的一种焦虑、精神错乱、人格改变及记忆受损的中枢神经系统并发症，并且老年患者发生率较高。研究推测，脑中特定区域的胆碱能神经通路参与了老年人POCD的 发 生［1］。 粒 细 胞 集 落 刺 激 因 子 （granulocyte colony stimulating factor，G－CSF） 能够诱导干细胞增殖、分化，促进神经营养因子释放，从而加强神经芽殖、突触发生、神经传递以及神经递质释放［2］，研究表明，G－CSF在脑缺血动物模型中具有神经保护作用［3］。常作为麻醉前用药的东莨菪碱，因其具有抗胆碱作用，常被用来建立研究抗痴呆药物的动物模型。本实验应用东莨菪碱致大鼠认知障碍动物模型，进一步研究G－CSF对抗胆碱药引起的认知障碍的影响及其相关机制。

1 材料与方法

1.1 药品与试剂 氢溴酸东莨菪碱（上海禾丰制药有限公司，批号130401）；重组人粒细胞集落刺激因子 （山东齐鲁制药， 批号201305019TC）；PV－9001兔二步法检测试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）；生物素化抗鼠IgG（武汉，博士德公司）；鼠抗ChAT多克隆抗体（武汉，博士德公司）；DAB显色试剂盒（北京中杉金桥生物技术有限公司）。

1.2 实验动物选择及分组 10月龄的Wistar雄性大鼠24只 （山东济宁鲁抗实验动物中心提供），体质量（480±30）g，分笼饲养一周适应环境，自由摄食摄水。实验前对大鼠使用Morris水迷宫（安徽淮北正华生物仪器设备有限公司）进行水迷宫适应性训练两次。随机分三组：空白组（N组），东莨菪碱组（S组）和G－CSF干预组（G组），每组8只。N组腹腔注射生理盐水1 ml，S组腹腔注射氢溴酸东莨菪碱1 mg／kg，G组腹腔注射氢溴酸东莨菪碱1 mg／kg后皮下注射G－CSF 50 μg／kg，连续5 d。……