NADPH氧化酶在心力衰竭患者心肌中的基因表达及其与心肌纤维化关系的研究

王梦龙，刘剑芳，刘梦林，冯颖，袁文慧，万军



心血管病研究

NADPH氧化酶在心力衰竭患者心肌中的基因表达及其与心肌纤维化关系的研究

王梦龙，刘剑芳，刘梦林，冯颖，袁文慧，万军

目的 探讨NADPH氧化酶(Nox)在心力衰竭患者心肌中的基因表达及其与心肌纤维化的关系。方法 采用Real-timePCR检测15例心力衰竭患者(心力衰竭组)和9例心脏移植供体(对照组)左心室心肌组织NoxmRNA表达水平，Westernblot检测Nox及MAPKs信号途径磷酸化水平，丙二醛(MDA)试剂盒检测心肌MDA含量，天狼猩红染色观察心肌纤维化程度。结果 与对照组比较，心力衰竭组心肌MDA含量明显升高，分别为(6.62±0.80)mmol/mgprot和(2.23±0.30)mmol/mgprot，差异有统计学意义(t=-12.947，P<0.01)。心肌Nox4mRNA表达水平明显上调(t=-3.144，P<0.01)，而Nox2及其亚基表达水平无明显变化；心肌纤维化程度明显增加(t=-12.947、-23.102，P<0.01)，同时MAPKs信号途径(p38、ERK1/2、JNK)磷酸化水平明显增加(t=-15.574、-12.434、-30.123，P<0.01)。结论 心力衰竭患者心肌氧化应激水平增加，可能与Nox4表达增加有关。Nox4通过激活MAPKs信号途径参与心肌纤维化过程，抑制Nox4可能降低心力衰竭患者心肌氧化应激和纤维化程度。

NADPH氧化酶；心力衰竭；氧化应激；心肌纤维化

心力衰竭是多种心血管疾病的终末环节，其发生发展机制尚不明确。心力衰竭过程中心肌出现一系列结构与功能的变化，包括结构重构、代谢重构及神经重构等。近来的研究提示活性氧(reactive oxygen species，ROS)生成增多引起的氧化应激在心肌重构中起重要作用[1]。心脏组织ROS有以下几种来源：线粒体电子传递链、黄嘌呤氧化酶、解偶联的内皮一氧化氮合酶和NADPH氧化酶(NADPH oxidase，Nox)[1，2]。Nox是惟一一类以生成ROS为主要功能的蛋白质，心血管系统表达4种Nox亚型(Nox1、 Nox2、 Nox4和Nox5)，其中心肌细胞主要表达Nox2和Nox4[3]。Nox2由胞膜亚基(gp91phox、p22phox)和胞浆内亚基(p47phox、p67phox、p40phox)组成，胞浆内亚基需与胞膜亚基结合才能完成Nox2激活过程；而Nox4主要由胞膜亚基(gp91phox、p22phox)组成，其活性变化依赖于Nox4表达水平。Nox2主要生成超氧阴离子，而Nox4主要催化生成过氧化氢(H2O2)[2]。动物实验发现Nox在心肌肥厚、心肌梗死、高血压病等多种疾病模型中起重要作用，但关于Nox在心力衰竭患者心肌中的表达报道甚少。……