膜联蛋白A3在前列腺癌早期诊断中的价值

魏 伟 杨明洲 宗华风 姜兴金 杨进益

膜联蛋白A3在前列腺癌早期诊断中的价值

魏 伟 杨明洲 宗华风 姜兴金 杨进益

目的 研究膜联蛋白A3（Annexin A3）在前列腺癌患者尿液中的表达, 探讨其在前列腺癌早期诊断中的价值。方法 59例可疑前列腺癌（总前列腺特异性抗原、直肠指诊异常）的住院患者, 采集前列腺按摩后的初始尿液标本, 使用聚合酶链式反应（PCR）检测尿沉渣中Annexin A3的表达, 结合穿刺病理结果分析不同尿Annexin A3浓度诊断早期前列腺癌的敏感性和特异性。结果 前列腺穿刺活检病理结果为前列腺癌19例, 前列腺增生40例。结论 检测尿液Annexin A3对于早期前列腺癌的诊断具有较高价值。

前列腺癌；膜联蛋白A3；前列腺特异性抗原；穿刺活检

前列腺癌的发病率有逐年增高的趋势, 常用的肿瘤标记物为前列腺特异性抗原（PSA）［1,2］。本研究探讨Annexin A3在可疑前列腺癌患者尿液中的表达, 提高早期前列腺癌的无创诊断率。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本院2010年5月～2014年9月因可疑前列腺癌住院患者59例, 年龄58～89岁, 平均年龄68岁；血PSA异常（4.13～10.19 ng/mL, 平均7.9 ng/mL）。

1.2 尿标本采集和处理 收集前列腺按摩后初始尿50 ml,离心收集尿沉渣, 2 h内送检或-80℃保存备用。超声引导下行前列腺穿刺10～12针, 行病理学诊断。

1.3 主要试剂和仪器 Trizol试剂（日本Takara公司）, 脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）, 焦炭酸二乙酯（DEPC）水, 昏随机引物, EXT-apTMR-PCR；高速离心机, MJ DNA Engine OPTICON2实时定量PCR仪。

1.4 实验步骤

1.4.1 核糖核酸（RNA）提取 用紫外分光光度仪测定A260和A280值；用2%甲醛变性琼脂糖凝胶电泳, 以鉴定RNA质量。按Takara一步法提取RNA, 使用微量分光光度计测定RNA浓度和纯度。

1.4.2 定量PCR反应。

1.5 统计学方法 数据采用SPSS17.0统计学软件进行分析。计量资料用均数±标准差（ χ-±s）表示, 采用t检验；计数资料用率（%）表示, 采用χ2检验。P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

前列腺癌组与前列腺增生症组患者Annexin A3 mRNA阳性率比较, 前列腺癌患者Annexin A3 mRNA阳性率明显高于前列腺增生患者, 差异具有统计学意义（P<0.01）。见表1。

表1 前列腺癌组与前列腺增生症组患者Annexin A3 mRNA阳性率比较［n, %］

3 讨论

近年来, PSA作为诊断前列腺癌的标记物, 在临床诊断前列腺癌的决定性价值越来越受到质疑, 减少不必要的前列腺穿刺活检, 是临床研究的热点。Annexin A3是膜联蛋白家族的一个亚型, 是新近发现的前列腺癌特异性标记物［3］。Kollermann等［4］检测到了Annexin A3在前列腺癌与良性上皮和高分级前列腺上皮内瘤中的表达水平。

血PSA是临床上广泛认可的诊断前列腺癌敏感的指标,研究显示PSA异常者患前列腺癌的可能性仅为20%～25%, 而10%的前列腺癌患者血清PSA和直肠指诊可以均正常。研究发现, 6例前列腺增生患者Annexin A3 mRNA阴性, 经过前列腺穿刺活检病理结果除外前列腺癌, Annexin A3 mRNA表达随着前列腺癌恶性程度增加而降低［5］, 在31.58%的前列腺癌患者中表达缺失；在前列腺良性增生患者中, 15%的患者表达缺失, 差异有统计学意义（P<0.05）。

Annexin A3作为筛查前列腺癌有益的指标, 可大幅提高早期前列腺癌的检出率, 具有检测方便、无创等优点。然而,本实验样本量较少, 检测方法较为单一, Annexin A3 的最优检测方法与参考值仍需进一步行多中心、大样本的前瞻性研究［6］。

［1］ 杨进益.应用PSA筛查前列腺癌的争论焦点.医学与哲学, 2009, 30（24）:51-52.

［2］ Hessels D, Schalken JA.Urinary biomarkers for prostate cancer: a review.Asian J Androl, 2013, 15（3）:333-339.

［3］ Rifai N, Watson ID, Miller WG.Commercial immunoassays in biomarkers studies: researchers beware! Clin Chem, 2012, 58（10）: 1387-1388.

［4］ Kollermann J, Schlomm T, Bang H, et al.Expression and prognostic relevance of annexin A3 in prostate cancer.Eur Urol, 2008, 54（6）:1314-1323.

［5］ Wozny W, Schroer K, Schwall GP, et al.Differential radioactive quantification of protein abundance ratios between benign and malignant prostate tissues: cancer association of annexin A3.Proteomics, 2007（7）:13-22.

［6］ Schröder FH, Venderbos LD, van den Bergh RC, et al.Prostate cancer antigen 3: diagnostic outcomes in men presenting with urinary prostate cancer antigen 3 scores≥100.Urology, 2014, 83（3）:613-616.

10.14164/j.cnki.cn11-5581/r.2015.10.060

2015-02-11］

116001 辽宁省大连市友谊医院泌尿外科（魏伟杨明洲 姜兴金 杨进益）, 病理科（宗华风）

杨进益