胃癌组织中Survivin和COX-2的表达及其相关性的研究

金锷

胃癌组织中Survivin和COX-2的表达及其相关性的研究

金锷

目的 探讨环氧合酶-2(COX-2)和生存素(Survivin)在胃癌的发生、发展过程中的作用。方法 选择61例胃癌组织和15例正常胃组织, 采用免疫组化方法检测两种组织的COX-2和Survivin的表达情况。结果 在61例胃癌组织中, 有46例COX-2胞浆阳性表达(75.4%), 正常胃组织为阴性表达, 差异有统计学意义(P＜0.05)；Survivin胞浆阳性表达31例(50.8%), 正常胃组织为阴性表达,差异有统计学意义(P＜0.05)。结论 Survivin与COX-2可能有共同的激活机制, 在胃癌的发生、发展过程中起重要作用。

环氧合酶-2；生存素；胃癌；免疫组化

胃癌(gastric cancer, GC)是消化道最多见的恶性肿瘤, 我国是高发区, 它的发生、发展是由多种癌基因, 包括原癌基因、抑癌基因、促凋亡基因、凋亡抑制基因共同参与多阶段的过程。从分子水平探讨胃癌发病是近年来研究的热点［1］。研究报告表明COX-2和Survivin是与胃癌生成密切相关的分子标志物, 二者可以通过信号传导在胃癌通路中相互作用［2］。本实验采用免疫组化方法检测了61例胃癌组织中COX-2、Survivin的表达, 以探讨其表达与胃癌是否相关。

1 资料与方法

1.1 一般资料 收集2003年1月～2007年1月手术切除的胃癌石蜡包埋标本61例, 其中男37例, 女24例, 年龄35～73岁, 平均年龄56岁；按TNM分期：Ⅰ期8例, Ⅱ期17例, Ⅲ期30例, Ⅳ6例；淋巴结转移阳性者36例(59.0%),淋巴结转移阴性者25例(41.0%)；分化程度为中高分化42例(68.9%), 低分化19例(31.1%)。术前患者均未化疗或放疗。对照组为正常的胃黏膜组织。

1.2 方法

1.2.1 组织芯片的制作 制作方法：将病理蜡块进行组织定位后, 采用组织阵列仪进行打孔取材(D=0.6 mm), 每块选2点, 制成阵列块；用切片机切成厚度为4 nm连续片；捞片、烤片、复诊, 制作成数张供免疫组化染色使用的组织芯片。

1.2.2 免疫组织化学染色 采用免疫组化方法检测COX-2和Survivin的阳性率, 按试剂盒步骤操作, 兔抗人多克隆抗体COX-2, 兔抗人多克隆抗体Survivin及sp免疫组化试剂盒均购自福建迈新生物开发有限公司。

1.2.3 结果判定 胃癌细胞胞浆中出现棕黄色颗粒为COX-2和Survivin阳性细胞, COX-2和Survivin的染色结果均采用HPIAS-1000高清晰彩色病理图文系统进行分析, 随机挑选5个高倍视野, 根据肿瘤细胞核或细胞质的染色细胞百分率及染色程度进行评分:0分为基本不着色.1分为着色淡.2分为着色适中.3分为着色深；0分是着色细胞占计数细胞百分率≤5%.1分是6%～30%.2分是31%～60%.3分是≥61%。将每张切片各自着色细胞百分率分数与着色程度分数相乘为其最后得分。阴性为0～1分, 弱阳性为2～3分, 中等阳性为4～6分, 强阳性为6分以上。

1.3 统计学方法 采用SPSS15.0统计软件进行数据分析。计数资料以率(%)形式表示, 实施χ2检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 胃癌中COX-2的表达及病理特征的关系 在61例胃癌组织中, 有46例COX-2胞浆阳性表达(75.4%), 正常胃组织为阴性表达, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

2.2 胃癌中Survivin的表达及与临床病理的特征性的关系 在61例胃癌组织中Survivin胞浆阳性表达31例(50.8%), 正常胃组织为阴性表达, 差异有统计学意义(P＜0.05)。见表1。

表1 胃癌组织和正常胃组织中Survivin、COX-2阳性表达情况比较［n (%)］

3 讨论

目前认为胃癌发病过程是多阶段的, 与基因积累相关。近年开展的细胞凋亡相关研究, 使人们对胃癌的发病机制有了更深刻的理解［3］。Survivin是研究人员1997年发现的凋亡蛋白抑制因子, COX-2是凋亡相关蛋白的一种, 通过抑制胃癌细胞的凋亡导致胃癌的发生、发展［4］。

Survivin是IAP家族中最小的成员, 在大多数分化正常的组织中无表达, 而在胚胎发育组织和肿瘤组织中却都有不同程度的表达［5］。Survivin可调节细胞有丝分裂［6］并特异性在G2/M期表达；有两条途径参与细胞凋亡：一是通过抑制凋亡通路下游的caspase-7和caspase-3起到抗凋亡作用。另外Survivin也可间接抑制caspase, 其机制是Survivin与CDK4(细胞因子周期调控因子)导致CDK/周期素E的激活和pb的碳酸化。生存素CDK4复合物形成后, 使复合体中释放P21, P21进一步与caspase-3(线粒体)结合并抑制其活性, 抑制细胞凋亡［7］。COX-2有COX-1和COX-2两种亚型。与肿瘤关系密切的是COX-2。正常组织中, COX-2基因不表达, 只有在细胞外才诱导表达, 如许多炎性细胞因子、生长因子、内毒素、白介素-1(IL-1)、肿瘤促进剂及癌基因等均可诱导体内组织产生COX-2［8］。COX-2能促进细胞增殖并在一定程度上抑制细胞凋亡, 参与肿瘤新生血管形成等机制对多种肿瘤的发生和发展过程有一定的影响［9］。

本研究发现, 61例胃癌组织中.46例COX-2胞浆表达阳性(占75.4%).15例正常胃组织表达阴性, 差异有统计学意义(P＜0.05)。COX-2在男性、淋巴结转移阳性者中高表达,而与年龄、肿瘤大小、分化程度等无关(P＞0.05)。61例胃癌组织中31例Survivin胞浆表达阳性(占50.8%).15例正常胃组织表达为阴性, 差异有统计学意义(P＜0.05)。Survivin表达阳性与性别、年龄、分化程度、肿瘤大小和淋巴结转移无关(P＞0.05)。从而推测Survivin与COX-2可能有共同的激活机理,并在胃癌的病因及发生、发展过程中起重要作用, 其具体机制有待深入研究。

［1］ Tsujii M, kawano S, Tsuji S, et al. Cyclooxygenase regulates angiogesis induced by colon cancer cells. Cell.1998, 93(5):705.

［2］ Tomozawa S, Nagawa H, Tsuno N, et al. Inhibition of haematogenous metastasis of colon cancer in mice by a selective cox-2 inhibitor JTE -522. Br J Cancer.1999, 81(8):1274.

［3］ Ambrosini G, Adida C, Altieri DC. A novel antiapoptosis-gene, surviving, expressed in cancer and lymphoma. Nat Med.1997.3(8):917-921.

［4］ Deveraux QL, Reed JC. IAP family proteins-suppressors of apoptosis. Genes Dev.1999.13(3):239-252.

［5］ Waskewich C, Blumenthal RD, Li H, et al. Celecoxib exhibits.the greatest potency amongst cyclooxygenase(cox)inhibitors for-Growth inhibition of cox-2-negative hematopoietic and epithelial cell lines. Cancer Res.2002 , 62(7):2029-2033.

［6］ Kojima M, Morisaki T, Vchiyama A, et al. Association of enhanced cyclooxygenase-2 expression with possible local immunosippression in human colorectal carcinomas. Ann Surg Oncol.2001, 8(5):458-465.

［7］ Kania J, Konturek SJ, Marlicz K, et al. Exepression of surviving and caspase-3 in gastric cancer. Dig Dis Sci.2003.48(2):266-267.

［8］ Lu CD, Altieri DC, Tanigawa N, et al. Expression of a novel antiapoptosis gene, surviving, correlated with tumor cell apoptosis and p53 accumulation in gastric carcinomas. Cancer Res.1998, 58(9):1808-1812.

［9］ Yu J, Leung WK, Ebert MP, et al. Increased expression of surviving in gastric cancer patients and in frist degree relatives. Br J Cancer.2002, 87(5):91-97.

Research of expression and correlation of Survivin and COX-2 in gastric cancer tissue

JIN E.
Department of Medical Oncology, Shenyang City the Fourth People’s Hospital, Shenyan.110030, China

Objective To explore the function of cyclooxygenase-2 (COX-2) and Survivin in occurrence and development of gastric cancer. Methods A total of 61 cases of gastric cancer tissues an.15 cases of normal gastric tissues were selected, and their expressions of COX-2 and Survivin were detected by immunohistochemical method. Results In the 61 cases of gastric cancer tissues, there wer.46 cases with positive expression of COX-2 cytoplasm (75.4%), while the normal gastric tissues showed negative expression. The difference had statistical significance (P＜0.05). There wer.31 cases with positive expression of Survivin cytoplasm (50.8%), and the normal gastric tissues also showed negative expression. The difference was statistically significant (P＜0.05). Conclusion Survivin and COX-2 may have a common activation mechanism, and they play important roles in the occurrence and development of gastric cancer.

Cyclooxygenase-2; Survivin; Gastric cancer; Immunohistochemistry

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.06.003

2014-10-09］

110030 沈阳市第四人民医院肿瘤内科