核酸染色剂SYBR－Gold染色特性分析

金 磊

（徐州医学院医学生物化学与分子生物学教学实验中心，江苏徐州221002）

核酸染色剂SYBR－Gold染色特性分析

金 磊

（徐州医学院医学生物化学与分子生物学教学实验中心，江苏徐州221002）

目的检测SYBR－Gold前染色与后染色的优缺点。方法采用前染色、后染色的方法使用SYBR－Gold对双链DNA进行染色检测，EB染色作为参照，琼脂糖凝胶电泳为检测手段，凝胶成像系统拍照观察。结果SYBRGold其前染色与后染色对于双链DNA检测能力均强于EB染色，但是SYBR－Gold预混凝胶前染色其分辨效果及DNA迁移速度受到DNA浓度的影响；SYBR－Gold预混样品的前染色方式对于目的基因的判读误差较大。结论SYBR－Gold不适合预混样品前染色，DNA样品浓度过大（大于250ng）不适合预混凝胶前染色，SYBR－Gold后染色是理想的染色方式。

SYBR－Gold；溴化乙锭；核酸染色剂；琼脂糖凝胶电泳

（Chin J Lab Diagn，2015，19：0194）

核酸染色在基因工程领域应用非常广泛，结合琼脂糖凝胶电泳可以分离、鉴定DNA片段大小，对于DNA浓度也可以根据荧光激发强度进行半定量［1］。目前，对于凝胶染色的核酸染色剂，溴化乙锭（Ethidium bromide、EB）仍然占据主导地位，EB可以结合双链DNA、单链DNA以及RNA，EB结合双链DNA后荧光强度激发比游离凝胶中的EB发出的荧光强度大20－25倍［2］，具备优越的DNA检测能力，在琼脂糖凝胶及聚丙烯酰胺凝胶中可分别检测痕量的双链DNA。但是EB具有致突变性，对于环境安全有一定影响［3］。

随着对核酸染色剂研究的深入以及化学合成技术的发展，出现了一些经过改进的花青类核酸染色剂，相对于EB具有染色灵敏度高、环保、对核酸的结合具有选择性等特点。……