八角枫茎中的新齐敦果烷型三萜成分*

马启珍，杨亚南，蒋少青，刘 信，尹 胜，唐贵华

(1.宁夏医科大学总医院药剂科，宁夏银川750004;2.中山大学药学院，广东广州510006)

八角枫 Alangium chinense(Lour.)Harms 隶属八角枫科Alangiaceae八角枫属Alangium植物，在我国主要分布于长江流域及以南各地，生长于海拔2500 m以下的森林、林缘或疏林中［1］。其根、叶及花均可入药，在民间有祛风、理气、通络、散瘀、镇痛等功效［2］。目前关于八角枫的化学成分研究主要集中在根和叶上，对八角枫的茎研究较少。前期研究发现八角枫的根和叶主要含有酚苷、生物碱、倍半萜等成分［3－8］。为了挖掘传统中药材的活性成分，开展了八角枫茎的乙醇提取物的化学成分研究，从中分离鉴定了2个新的齐敦果烷型三萜(1和2)和2个已知化合物(3和4)，见图1。本文报道新化合物分离及结构鉴定。

1 结果与讨论

1.1 化合物结构鉴定

图1 从八角枫茎中分离鉴定的4个化合物结构Fig.1 Structures of compounds 1，2，3，4 from the stems of Alangium chinense

化合物1，白色无定形粉末。根据高分辨ESI质谱数据并结合其13C NMR数据推断出化合物的分子式为C48H60O9，不饱和度为19。其IR图谱所示的吸收值3315，1689，1631，1604，1515 cm－1表明有羟基、羰基、双键和苯环等官能团存在。化合物1的1D NMR数据 (表1)显示的信号表明结构中存在1个反式对羟基桂皮酰基［δH7.58(1H，d，J=15.9 Hz)，7.43(2H，d，J=8.3 Hz)，6.80(2H，d，J=8.3 Hz)和6.30(1H，d，J=15.9 Hz);δC168.76，161.1，146.5，131.2(C × 2)，127.2，116.8(C×2)和115.5］，1个反式咖啡酰基［δH7.55(1H，d，J=15.9 Hz)，7.04(1H，s)，6.91(2H，d，J=8.0 Hz)，6.77(1H，d，J=8.0 Hz)和 6.25(1H，d，J=15.9 Hz);δC168.83，149.6，147.1，146.8，127.7，123.0，116.5，115.3和115.0］，6个单峰甲基［δH1.13(3H，s)，1.02(3H，s)，0.97(3H，s)，0.93(3H，s)，0.89(3H，s)和 0.89(3H，s)］，1个羟甲基［δH4.08(1H，d，J=11.6 Hz)和3.84(1H，d，J=11.6 Hz);δC66.6］，1个羧酸羰基［δC182.1］，1个三取代的双键［δH5.23(1H，br.s);δC145.3和123.4］，1个连氧次甲基［δH4.96(1H，t，J=7.7 Hz);δC76.2］，10个sp3杂化的亚甲基，3个sp3杂化的次甲基和6个sp3杂化的季碳。根据以上的信息分析，推测化合物应该是一个连有1个对羟基桂皮酰基和1个咖啡酰基的五环三萜类成分。又与从该种分离得到的已知齐敦果烷型三萜成分 (3)的NMR数据比较，发现化合物1的结构与其非常类似，其主要不同点在于化合物1的3位羟基被一个咖啡酰基所取代，并由H－3与C－9'的HMBC相关得到确证。分析化合物1的1H－1H COSY和HMBC相关 (图2)确定化合物1的其它结构片段与3一样。另外，通过比较1D NMR数据和ROESY相关确定化合物1的相对构型与3一致，如图1所示。由此，化合物1的结构鉴定为(3E，23E)-3-caffeoyl-23-coumaroylhederagenin(1)。

图2 化合物1的关键1H－1H COSY和HMBC相关Fig.2 Key1H－1H COSY and HMBC correlations of compound 1

化合物2，白色无定形粉末。其高分辨ESI质谱数据显示化合物2的相对分子质量比1少16，推出分子式为C48H60O8，提示该化合物比1少了1个氧原子。比较它们的NMR数据 (表1)发现2与1非常相似，差异仅存在3位的取代基上。化合物2出现的2个反式对羟基桂皮酰基的信号并结合解析其HMBC相关推断2的3位和23位的取代基均为反式桂皮酰基。化合物2的相对构型由ROESY和1D NMR数据分析确定与1一致。因此，化合物2的结构鉴定为 (3E，23E)-dicoumaroylhederagenin(2)。

通过比较文献报道的核磁数据，已知化合物3和4的核磁数据与文献 ［9］基本一致，因而确定它们的结构分别为 (23E)-coumaroylhederagenin和(23Z)-coumaroylhederagenin。

2 实验部分

2.1 材料与仪器

Bruker-AvanceIII-400核磁共振仪 (TMS内标);Bruker Tensor 37红外光谱仪;AutopolⅠ旋光仪;Finnigan LCQ Deca液质联用仪;Micromass QTOF液质谱联用仪;岛津高效液相色谱仪 (LC-20AT，PDA SPD-M20A检测器);EYELA N-1100型旋转蒸发仪;循环水多用真空泵;超声波清洗仪;暗箱紫外分析仪;RP-C18硅胶 (日本YMC);YMC液相色谱柱 (250×10 mm，S-5 μm，12 nm);菲罗门液相色谱柱 (Phenomenex Lux，cellulose-2，250×10 mm，5 μm);Sephadex LH-20(美国 GE 公司);TLC硅胶板 (GF254)和柱层析硅胶 (100～200，300～400目)(青岛海洋化工)。

分析纯试剂:甲醇、无水乙醇、φ=95%乙醇、正丁醇、乙酸乙酯、丙酮、二氯甲烷和石油醚;HPLC色谱级试剂:甲醇和乙腈;氘代试剂:氘代甲醇。

表1 化合物1和2的氢谱 (400 Hz)及碳谱 (100 Hz)数据 (Methanol-d4溶剂)Table 11H NMR(400 Hz)and13C NMR(100 Hz)data of compounds 1 and 2(in Methanol-d4)

植物材料购自云南大理，经由中山大学唐贵华博士鉴定为八角枫 Alangium chinense(Lour.)Harms的茎。凭证标本 (No.BJF2012001)存于中山大学药学院天然药物化学实验室。

2.2 提取与分离

干燥的八角枫茎 (2.0 kg)粉碎后用φ=95%乙醇超声提取3次 (3 L×3)，每次2 h，合并乙醇提取液减压浓缩得到粗提浸膏。浸膏用水悬浮后分别用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取，其中乙酸乙酯萃取部位 (4.1 g)经过正相硅胶柱 (100～200目)，洗脱体系为二氯甲烷/甲醇(V(二氯甲烷)∶V(甲醇)为 80∶1，60∶1，20∶1，10∶1，5∶1，0∶1)，得到5个组分(Fr.Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅴ)。组分 Fr.Ⅲ再经过反相RP-C18柱(洗脱体系甲醇水，φ(甲醇)为50% ～100%)得到3个组分(Fr.Ⅲa，Ⅲb，Ⅲc)。其中组分Fr.Ⅲb经过反复的正相硅胶(300～400目)和半制备HPLC纯化获得化合物1(17 mg)，2(70 mg)，3(4 mg)和4(9 mg)。

3 物理常数及波谱数据

化合物1，白色无定形粉末。 ［α］20D+92(c 0.1);UV(MeOH)λmax/nm(log ε):315(4.52)，221(4.35)，207(4.36);IR(KBr)νmax/cm－1:3315，2945，1689，1631，1604，1515，1444，1384，1362，1264，1203，1169;1H NMR 和13C NMR数据见表 1;ESIMS m/z 803［M+Na］+;HRESIMS m/z 803.4129 ［M+Na］+(C48H60O9Na，计算值为803.4135)。

化合物2，白色无定形粉末。 ［α］20D+148(c 0.1);UV(MeOH)λmax/nm(log ε)314(4.64)，229(4.27);IR(KBr)νmax/cm－1:3294，2947，1689，1632，1604，1514，1441，1384，1364，1307，1203，1169;1H NMR和13C NMR数据见表1;ESIMS m/z 787 ［M+Na］+;HRESIMS m/z 787.4181［M+Na］+(C48H60O8Na，计算值为787.4186)。

化合物3，白色无定形粉末。ESIMS m/z 641［M+Na］+;1H NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ:7.63(d，J=15.9 Hz，1H)，7.45(d，J=8.6 Hz，2H)，6.82(d，J=8.6 Hz，2H)，6.34(d，J=15.9 Hz，1H)，5.24(d，J=3.6 Hz，1H)，4.12(d，J=11.3 Hz，1H)，4.03(d，J=11.3 Hz，1H)，3.62(dd，J=11.5，4.7 Hz，1H)，2.84(dd，J=14.0，4.6 Hz，1H)，1.10(s，3H)，0.99(s，3H)，0.93(s，3H)，0.90(s，3H)，0.82(s，3H)，0.78(s，3H);13C NMR(Methanol-d4，100 MHz)δ:181.8(C)，169.0(C)，161.3(C)，146.5(CH)，145.2(C)，131.2(CH× 2)，127.1(C)，123.6(CH)，116.9(CH ×2)，115.2(CH)，72.8(CH)，66.7(CH2)，49.4(CH)，49.1(CH)，47.6(C)，47.2(CH2)，43.2(C)，42.9(C)，42.7(CH)，40.6(C)，39.7(CH2)，38.0(C)，34.9(CH2)，33.8(CH2)，33.7(CH2)，33.6(CH3)，31.6(C)，28.8(CH2)，27.4(CH2)，26.4(CH3)，24.5(CH2)，24.03(CH2)，23.99(CH3)，19.3(CH2)，17.7(CH3)，16.3(CH3)，12.8(CH3)。

化合物4，白色无定形粉末。ESIMS m/z 641［M+Na］+;1H NMR(400 MHz，Methanol-d4)δ:7.55(d，J=8.6 Hz，2H)，6.89(d，J=12.8 Hz，1H)，6.76(d，J=8.6 Hz，1H)，5.79(d，J=12.7 Hz，1H)，5.21(t，J=3.2 Hz，1H)，4.05(d，J=11.4 Hz，1H)，3.99(d，J=11.4 Hz，1H)，3.45(dd，J=11.6，4.6 Hz，1H)，2.83(dd，J=14.0，4.6 Hz，1H)，1.00(s，3H)，0.938(s，3H)，0.935(s，3H)，0.91(s，3H)，0.77(s，3H)，0.73(s，3H)。

［1］QIN H，CHAMLONG P.Flora of China［M］.Beijing:Science Press，2007，Vol.13:304－308.

［2］国家中医药管理局《中华本草》编委会.中华本草:第5册［M］.上海:上海科学技术出版社，1999:724－727.

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