Agilent荧光检测器电子倍增管值与检测器噪音、最小检测浓度关系*

何海红 何雅娟 王卫华

(中国计量科学研究院，北京 100029)



Agilent荧光检测器电子倍增管值与检测器噪音、最小检测浓度关系*

何海红 何雅娟 王卫华

(中国计量科学研究院，北京 100029)

本文通过分析不同电子倍增管(PMT)值下，美国Agilent公司的1200型号荧光检测器测量萘-甲醇溶液得到的基线噪音、峰高与最小检测浓度的数据，并对这三种量值的关系进行讨论，发现随着PMT值的增大，样品峰高增大，但噪音信号也随着增加，从而造成最小检测浓度先下降再增高的趋势。最终得出PMT值不是越大越好的结论，为检测人员合理设定检测器参数提供技术参考。

液相色谱仪；荧光检测器；PMT；最小检测浓度

0 引言

液相色谱仪用荧光检测器属于高灵敏度选择性检测器，主要用来测量紫外光照射时它们可受激发而发出荧光的物质的样品，如水中的多环芳烃、黄曲霉素等。市面上的进口荧光检测器主要为美国Agilent公司、美国Waters公司、日本岛津公司和日本日立公司生产的产品，其中美国Agilent公司生产的荧光检测器在市场占有较大的份额。笔者在实验中发现Agilent公司生产的荧光检测器的噪音大小与仪器检测器的灵敏度档位(PMT即photomultiplier tube，光电倍增管)设定关系密切，从而对最小检测浓度产生影响。在实际检测和液相色谱仪检定过程中，往往面临如何设定PMT值才能得到最好实验结果的问题。在本文中，笔者参照JJG 705-2014液相色谱仪检定规程中荧光检测器定性定量重复性以及最小检测浓度的检定方法进行试验，将美国Agilent公司生产的1200型号荧光检测器的PMT值、噪音、最小检测浓度数据进行统计，讨论荧光检测器的PMT值与检测器噪音、最小检测浓度的关系。

1 实验部分

1.1 主要仪器与试剂

配置1200荧光检测器的Agilent 1200液相色谱系统；

100mL容量瓶(A级)；1mL移液器(德国Eppendorf公司)。

甲醇：色谱纯，德国merk公司；

萘-甲醇溶液：标物编号GBW(E)130167，1.00×10-4g/mL，U=4%，k=2；标物编号GBW(E)130168，1.00×10-7g/mL，U=4%，k=2。

1.2 分析条件

色谱柱：Agilent ZORBAX Eclipse XDB C-18(50mm×4.6mm,3.5μm)；

流动相：甲醇；

流速：1.0mL/min；

激发波长Ex=290nm，发射波长Em=330nm；

PMT值分别按照表1中PMT值设定，从1～14，以1为步进；

进样量：每次进样20μL。

1.3 样品测定过程

1.3.1 仪器的预热

仪器电源打开，安装色谱柱后启动泵运行流动相，然后，打开检测器氙灯进行预热，按照1.2的条件对仪器进行设定，等待30min后，仪器达到稳定状态。

1.3.2 标准溶液的配制

取标物编号GBW(E)130167的萘-甲醇溶液1mL，加入到100mL容量瓶里面，用甲醇稀释到刻度，得到浓度为1.0×10-6g/mL萘-甲醇溶液。

1.3.3 样品测定

使用1.0×10-6g/mL萘-甲醇溶液连续进样2次，记录萘-甲醇的峰高。并在选取萘峰前0.5～1.5min时间段范围内的噪音的平均值作为基线噪音。

2 结果与讨论

按照表1中PMT数值进行检测器档位设定运行方法，记录第二个数据中萘-甲醇的峰高和基线噪音，并根据基线噪声、进样浓度和体积按下式计算最小检测浓度：

(1)

式中，cL为最小检测浓度，g/mL；Nd为基线噪声峰高，LU；c为萘-甲醇溶液浓度，g/mL；V为进样体积，20μL；H为萘峰高，LU。

萘-甲醇溶液在1200荧光检测器上的噪音、峰高以及按照式(1)计算得到的最小检测浓度数据见表1所示。

表1 检测数据

由表1可以看出，同样色谱条件，进同样的样品，PMT值每增加1，峰高值大概都增加1倍；但随着PMT值的增加，噪音不是成整数倍的增加。在PMT值从1→10的过程中，最小检测浓度趋于逐渐变小，说明在这个过程中PMT值增加使样品信号增加的比例大于噪音增加的比例；但是当PMT增加到11以上后，最小检测浓度变化趋势变得缓慢，说明PMT值增加所造成的样品信号与噪音的增加是同步的。

仪器公司对于检测器的设定，默认的PMT为10，这个设定笔者觉得也是根据数据统计出来的。PMT值升高，仪器最小检测浓度会降低但不会一直降低，还有可能导致仪器损耗加速、信号饱和。所以，不是PMT值越高越好，要根据实际检测需求合理的设定PMT值。

3 结论

荧光检测器是在液相色谱测试过程中广泛使用的一种检测器。增大PMT值会提高检测灵敏度，但也有可能造成噪音的增加。故而在荧光检测器的检定过程中，在做最小检测浓度检定的时候，可以把PMT设定为最灵敏的数值，但是，在做重复性的时候用的都是高浓度样品，此时PMT值设定在10就足够了，希望广大检定员在日常检定过程中注意这个问题；对于进行样品检测的实验人员，在做痕量样品检测时可以把PMT值设定到最灵敏的位置，在做常规检测时使用仪器公司的建议值就可以了。

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[6] 李伟红.高效液相色谱法测定熟肉制品中的苯并(a )芘[J].江西农业学报,2008，20(1)

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10.3969/j.issn.1000-0771.2015.10.02

*国家重大科学仪器设备开发专项(2013YQ51039104)