基于流式细胞术的小鼠血小板聚集率检测方法评价及川芎嗪的干预作用

梅金平,周 欣,姬文婕,马永强,杨国红,郭兆增,李玉明,赵季红

·基础医学论著////研究·

基于流式细胞术的小鼠血小板聚集率检测方法评价及川芎嗪的干预作用

梅金平1,周 欣2,姬文婕2,马永强2,杨国红2,郭兆增2,李玉明2,赵季红2

目的评价一种新的基于流式细胞术(Flow cytom etry,FCM)小鼠血小板聚集活性检测方法,以及川芎嗪的干预作用。方法CD61-PE和CD61-FITC标记的小鼠血小板(n=5)混合后加入ADP(终浓度20μmol/L)诱导血小板聚集,同时标记两种荧光染料的细胞群占所有血小板的百分比来评估血小板聚集功能;16只雄性C57BL/6J小鼠随机分为生理盐水组和氯吡格雷组, FCM检测小鼠血小板聚集功能;FCM检测川芎嗪(TMPZ)低、中、高浓度(终浓度分别为0.5 mg/ml、1 mg/ml、2 mg/ml)和替罗非班(终浓度为5μg/ml)对小鼠血小板聚集功能的影响。结果经ADP(终浓度20μmo l/L)诱导激活后含有双色荧光标记的细胞群即血小板聚集体明显增多(P<0.01);FCM检测小鼠服用氯吡格雷后其血小板聚集率显著降低[由(19.57±1.12)%降至(8.71± 1.21)%,P<0.01];与生理盐水组相比,TMPZ低、中、高剂量和替罗非班均能显著降低小鼠血小板聚集率(P<0.05)。结论基于流式细胞术的小鼠血小板聚集活性检测方法能够准确反映P2Y12受体拮抗剂、GPⅡb/Ⅲa受体阻断剂以及川芎嗪的抗血小板活性,对于血小板相关基础研究和抗血小板药物筛选平台具有借鉴价值。

血小板聚集;流式细胞术;川芎嗪;小鼠

血小板在生理性止血、维持血管壁完整以及某些病理过程,如血栓形成、动脉粥样硬化、不稳定型心绞痛、肿瘤转移和炎症反应等过程中起着重要作用[1]。因此,血小板功能检测对早期发现是否有血栓形成以及与血小板相关疾病的诊断和治疗有着重要的意义[2,3]。小鼠作为模式生物之一,除了和人类有着极为相似的生理解剖结构和胚胎发育过程,其与人类基因序列的同源性高达80%[4],因此可以利用小鼠作为动物模型来研究抗血小板药物对机体的影响[5]。但检测小鼠血小板功能的方法却鲜有报道。……