葛根素减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤

粟 凤，林安晓，乔东方，丁 菁，陆德琴

(贵阳医学院 病理生理学教研室， 贵州 贵阳 550004)



葛根素减轻大鼠心肌缺血-再灌注损伤

粟 凤，林安晓，乔东方，丁 菁，陆德琴*

(贵阳医学院 病理生理学教研室， 贵州 贵阳 550004)

葛根素(puerarin, PUE)注射液对心肌缺血-再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury, I/R)具有保护作用[1]，但其作用机制尚不完全清楚。内皮型一氧化氮合酶(eNOS)/一氧化氮(NO)功能障碍已被认为是心血管疾病发病中的一个重要环节。PUE的心肌保护作用机制是否与eNOS有关？本实验拟采用大鼠心肌I/R损伤模型，探索PUE的心肌保护作用机制。

1 材料与方法

1.1 动物及试剂： 清洁级雄性SD大鼠54只，体质量200～250 g[贵阳医学院实验动物中心提供，动物合格证序号为SCXK(渝)2011- 0005]。PUE注射液(湖北天药药业有限公司)。NO检测试剂盒(Calbiochem公司)；兔抗eNOS Ser1177抗体、兔抗eNOS Ser633抗体(Millipore公司)；兔抗β-tubulin抗体、兔抗eNOS抗体及HPR标记的羊抗兔的二抗(Santa Cruz公司)；TTC(Solarbio公司)；CK-MB和cTnI检测试剂盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 方法

1.2.1 实验分组及处理，大鼠随机分为3组。1)假手术(sham)组；2)I/R组：参照文献[2]复制心肌I/R模型，结扎LAD 45 min后放松结扎线120 min；3)PUE组：结扎LAD前15 min经左颈静脉注射PUE(2.5 mL/kg，浓度40 g/L)，其余操作同I/R组。

1.2.2 左室血流动力学指标测定，采用BL-420E生物机能实验系统(成都泰盟公司)测定左室血流动力学，记录缺血前、缺血45 min及再灌注120 min时左心室收缩压(LVSP)、左心室舒张末压(LVEDP)及左心室内压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)。

1.2.3 心肌梗死面积测定，TTC法测定心肌缺血和梗死面积。以缺血区心肌重量与左室重量之百分比表示缺血面积，以梗死区心肌重量与缺血区心肌重量之百分比表示梗死面积。……