NIX介导的细胞自噬在低氧诱导ATⅡ凋亡中的作用

黄一，王婷婷，游凯，张明灿

NIX介导的细胞自噬在低氧诱导ATⅡ凋亡中的作用

黄一，王婷婷，游凯，张明灿

目的探讨NIX蛋白在低氧诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）凋亡中的作用。方法以自噬抑制剂和caspase抑制剂分别预处理人ATⅡ细胞株A549 1 h后，再低氧暴露24 h，Annexin V和碘化丙啶（PI）染色，流式细胞仪检测细胞凋亡。为了分析NIX介导的自噬在低氧诱导的ATⅡ细胞凋亡中的作用，以siRNA沉默NIX表达后，观察低氧暴露后细胞自噬水平的变化（MDC染色观察自噬溶酶体数量、Western blot检测自噬相关蛋白Beclin-1和LC3Ⅱ的表达变化）以及凋亡的变化。结果低氧诱导的细胞凋亡分别被自噬抑制剂和caspase抑制剂减弱；低氧暴露促进NIX表达并上调细胞自噬水平；沉默NIX能下调细胞自噬水平，减少低氧诱导的细胞凋亡，且作用可被caspase抑制剂减弱，而不被自噬抑制剂减弱。结论低氧暴露引起NIX蛋白表达而导致其介导的细胞自噬增加，这可能是低氧诱导ATⅡ细胞非caspase依赖性凋亡的机制之一。

肺泡；Ⅱ型上皮细胞；NIX；自噬；凋亡

低氧是急性肺损伤发生和发展的中心环节。肺泡上皮细胞最早暴露于低氧环境，易发生结构和功能损害。越来越多的证据表明，缺氧诱导的肺泡Ⅱ型上皮细胞（ATⅡ）凋亡在急性肺损伤中具有重要作用，但是目前对低氧诱导ATⅡ凋亡机制并未阐明。虽然目前认为caspase依赖的Fas/Fasl系统介导的凋亡为主要途径，但还有研究发现存在有NIX蛋白参与的非caspase依赖性的凋亡通路[1]。NIX蛋白与细胞自噬密切相关，并且我们前期研究发现，缺氧导致肺组织NIX蛋白表达明显增高，并且与ATⅡ细胞凋亡呈显著性正相关，但是其分子机制尚不明确。……