硝普钠及SOD降低大鼠心肌细胞DNA蛋白激酶二聚体和Ku70/80表达

江 文，李 伟，周成斌*

(1.南方医科大学 广东省人民医院 广东省心血管病研究所， 广东 广州 510080;2.四川大学 华西医院 骨科， 四川 成都 610041)



研究论文

硝普钠及SOD降低大鼠心肌细胞DNA蛋白激酶二聚体和Ku70/80表达

江 文1，李 伟2，周成斌1*

(1.南方医科大学 广东省人民医院 广东省心血管病研究所， 广东 广州 510080;2.四川大学 华西医院 骨科， 四川 成都 610041)

目的观察硝普钠(SNP)及自由基清除剂超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)对大鼠心肌细胞H9C2和心肌组织DNA-PKcs和Ku70/80表达的影响。方法体外培养H9C2心肌细胞按SNP浓度和加入的自由基清除剂SOD和CAT浓度分组；SD大鼠随机分为5组，每组8只，分别采用0.9%氯化钠溶液、SNP、SNP+SOD、SNP+CAT和SNP+SOD+CAT行腹腔注射，1周后收集心肌组织。用Western blot法检测各组细胞DNA-PKcs和Ku70/80表达，免疫组织化学法检测DNA-PKcs和Ku70/80表达。结果心肌细胞的DNA-PKcs和Ku70/80蛋白相对表达量均随SNP剂量增加呈递增趋势；加入SOD或CAT或二者合用, 均显著降低DNA-PKcs和Ku70/80表达(P<0.05)。SNP组、SNP+SOD组、SNP+CAT组和SNP+SOD+CAT组大鼠心肌组织DNA-PKcs和Ku70/80表达水平均显著高于对照组(P<0.05)。结论自由基清除剂SOD和CAT能够通过降低心肌细胞DNA-PKcs和Ku70/80的表达拮抗NO对心肌细胞的损伤。

硝普钠；自由基清除剂；心肌细胞；DNA依赖性蛋白激酶催化亚基；Ku70/80二聚体蛋白

DNA依赖蛋白激酶催化亚单位(catalytic subunit of the DNA-dependent protein kinase, DNA-PKcs)其与调节亚基Ku70/Ku80二聚体共同启动细胞非同源末端连接(non-homologous end joining, NHEJ)修复信号传导，在DNA复制、基因转录调控和端粒结构维持等方面发挥重要作用[1]。DNA-PKcs和Ku70/Ku80二聚体在多种病变组织内存在异常表达，与基因组不稳定和细胞凋亡密切相关[2- 3]。病理状态下，脂多糖及细胞因子等能够诱导心肌细胞产生大量的一氧化氮(nitric oxide, NO)，发挥不良反应，参与心肌损伤、凋亡和心脏移植后排异等病理反应[4]。有关NO 对心肌细胞损伤修复机制的影响尚未见报道，自由基清除剂的作用也未得到验证。……