不同产地苕叶细辛中马兜铃酸A的HPLC测定

高智席等

摘要：建立了反相高效液相色谱法测定苕叶细辛（Asarum Insigne Diels）中马兜铃酸A含量的方法。色谱柱为Shim-pack VP-ODS（150 mm×4.6 mm，5 μm），以甲醇∶0.1%冰乙酸=70∶30（V/V）为流动相，检测波长为225 nm。结果表明，马兜铃酸A在0.087 4～8.098 0 μg/mL（R2=0.999 7）范围内与峰面积呈良好线性关系，平均回收率为96.95%～99.42%，相对标准偏差为2.63%～3.72%，检测限为0.003 μg/mL。该方法灵敏度高、操作简便、结果准确、重复性好，可用于苕叶细辛中马兜铃酸A的测定。

关键词：苕叶细辛（Asarum Insigne Diels）；马兜铃酸A；反相高效液相色谱法

中图分类号：O657.7+2 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2015）12-3008-02

DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2015.12.054

Determination of Aristolochic acid A in Asarum Insigne Diels

from Different Places by HPLC

GAO Zhi-xi1，2， LI Si1， JIANG Zhong-yuan1， HU Hai-jun2， HAN Chang2， L？譈 Chao-yan2

（1. Laboratory of Utilization Research on Characteristic Resources in Qianbei， Zunyi 563002， Guizhou， China；

2.institute of Agricultural science and Technology， Zunyi Normal College，Zunyi 563002， Guizhou， China）

Abstract： Aristolochic acid A in Asarum insigne Diels was determined by reversed-phase high performance liquid chromatography （HPLC）. The analysis was performed with Shim-pack VP-ODS column（150 mm × 4.6 mm，5 μm） with the mobile phase of MeOH∶0.1%acetic acid=70∶30（V/V） at 225 nm. The results showed that the Aristolo chicacid A had a good linear relationship in the range of 0.087 4～8.098 0 μg/mL（R2=0.999 7）. The average recoveries were 96.95%～99.42% with RSD of 2.63%～3.72%， and the detection limit was 0.003 μg/mL. This method is sensitive， convenient， accurate and reproducible for determining aristolochic acid A in Asarum insigne Diels.

Key words： Asarum insigne Diels； aristolochic acid A； RP-HPLC

苕叶细辛（Asarum insigne Diels）为马兜铃科细辛属植物，常作中草药使用，以全草入药，具有祛风散寒、止咳祛痰、活血解毒、止痛之功效，临床上用于治疗风寒感冒、风湿性关节疼痛、咳嗽、跌打损伤等。马兜铃酸A为硝基菲酸类化合物，可作用肾小管上皮细胞、肾间质成纤维细胞，降低肾小球滤过率，使血、尿肌酐增加，引起肾衰竭，急性马兜铃酸肾病、肾小管功能障碍型马兜铃酸肾病、慢性马兜铃酸肾病及癌症等[1，2]。因此分析苕叶细辛中的马兜铃酸A对指导苕叶细辛的用药量具有重要意义。目前分析马兜铃酸A的方法包括高效液相色谱法[3，4]、薄层色谱法[5]。本试验建立了反相高效液相色谱法测定马兜铃酸A含量方法，其灵敏度高，分离效果好，为细辛属植物中马兜铃酸A的含量分析提供参考。

1 材料与方法

1.1 材料

马兜铃酸A标准品（110746-200507）购于中国药品生物制品检定所，分析纯甲醇购于成都市科龙化工试剂厂，去离子水。所有溶液使用前均由0.45 μm孔径的滤膜过滤。市售5批苕叶细辛样品由遵义医学院黎刚老师鉴定，0～5 ℃保藏待用。……