下调miR-21通过PDCD4抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖并抑制PI3K/Akt信号通路

慕生枝，孙要文，王国栋

（陕西省人民医院烧伤整形医学美容外科　陕西　西安　710068）

下调miR-21通过PDCD4抑制人增生性瘢痕成纤维细胞增殖并抑制PI3K/Akt信号通路

慕生枝，孙要文，王国栋

（陕西省人民医院烧伤整形医学美容外科陕西西安710068）

目的：探讨microRNA-21（miR-21）对人增生性瘢痕成纤维细胞中程序性细胞死亡因子（PDCD4）表达和细胞增殖的影响及机制。方法：利用荧光定量PCR检测正常皮肤成纤维细胞GM0639和人增生性瘢痕成纤维细胞（HSF）中miR-21的表达。构建含有PDCD4-pGC-Fu-GFP慢病毒和空载体对照慢病毒pGC-Fu-GFP感染HSF细胞。将HSF细胞按照不同处理方法分为：空白对照组、转染非特异miRNA的阴性对照组、转染miRNA-21抑制物的mir21 Inhibitor组、转染miR-21质粒的miR-21 mimic组、PDCD4-pGC-Fu-GFP组、pGC-Fu-GFP组和Ly294002组。转染后48h收集细胞，MTT检测细胞增殖情况。采用免疫荧光技术、荧光定量PCR和Western blot检测空白对照组、阴性对照组、miR-21 mimic组和miR-21 Inhibitor组细胞中PDCD4的表达以及基因和蛋白水平。采用荧光定量PCR和Western blot检测PDCD4-pGC-Fu-GFP组、pGC-Fu-GFP组和Ly294002组细胞周期相关蛋白C-MYC，CCND1以及通路相关蛋白p-Akt、JNK1的蛋白表达。结果：HSF细胞中miR-21呈现高表达。与空白对照组相比，抑制miR-21表达可以抑制HSF细胞增殖，上调PDCD4表达。过表达PDCD4可以抑制细胞增殖，下调细胞周期相关蛋白C-MYC，CCND1的表达，同时抑制通路蛋白p-Akt和JNK1的表达。结论：下调miR-21的表达能够促进PDCD4表达，抑制HSF细胞增殖以及PI3K/AKt信号通路。

microRNA-21；PDCD4；人增生性瘢痕成纤维细胞；细胞增殖；抑制；PI3K/Akt

增生性瘢痕（hypertrophic scar，HS）常发生于创伤尤其是烧伤后，是一种病理性愈合现象，不仅影响美观而且可能导致机体功能障碍[1]。在组织学上增生性瘢痕的形成是由伤区成纤维细胞过度增殖、胶原分泌活性增强导致。……