ARID1A对乳腺癌生长的抑制及潜在调控机制

张 倩 颜海波 刘 锋

(复旦大学生物医学研究院医学系统生物学研究中心 上海 200032)

ARID1A对乳腺癌生长的抑制及潜在调控机制

张 倩 颜海波 刘 锋△

(复旦大学生物医学研究院医学系统生物学研究中心 上海 200032)

目的 探讨ARID1A(AT-rich interactive domain containing protein 1A)对乳腺癌发生、发展的影响,包括对细胞增殖、细胞周期、细胞凋亡的影响及潜在的机制。方法 采用小发夹RNA(short hairpin RNA, sh RNA)及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)的RNA干扰技术(RNA interference,RNAi)下调细胞ARID1A基因表达,采用瞬时表达及稳定表达方法过表达ARID1A;通过Western blot检测干扰或过表达ARID1A基因后其蛋白表达水平及P-Akt、PARP和Caspase-3蛋白水平的变化,应用MTT法、细胞计数法及克隆形成检测细胞增殖的变化;应用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期的变化。结果 应用RNA干扰技术沉默ARID1A基因后,乳腺癌细胞或正常乳腺细胞增殖速度显著上升(Bcap-37-siARID1A,P＜0.001;MCF7-siARID1A,P＜0.01;MCF10A-sh ARID1A,P＜0.001;HMEC-sh ARID1A,P＜0.001),Akt磷酸化水平上升,克隆形成能力显著提高。过表达ARID1A后,细胞增殖速率均显著下降(P＜0.001),Akt磷酸化水平下降,细胞周期发生变化,其中S期减少,G2期增多,同时细胞凋亡比例上升。结论 ARID1A在乳腺癌中发挥着抑制肿瘤生长的作用,提示ARID1A可能成为临床检测、诊断和治疗的有效潜在靶标。

ARID1A; 肿瘤抑癌基因; 乳腺癌

*This work was supported by the Chinese National Key Program on Basic Research(2011CB910702,2013CB911202)and the Natural Science Foundation of Shanghai(14ZR1402100).

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤之一,2008年全球女性新增的乳腺癌患者占所有癌症患者的23%,其新增加死亡比例为14%[1]。在西方发达国家,乳腺癌发病率占女性恶性肿瘤的首位。目前中国乳腺癌发病已进入快速增长期,女性中乳腺癌的发病率是10万之10～60,预测到2021年乳腺癌的发病率将达到10万分之100,其中HER2阳性的乳腺癌升幅最快,患者数量在过去30年间增加了96%,并且发病高峰以44～55岁左右女性为主。……