传统发酵牦牛酸乳宏基因组DNA三种提取方法比较研究

谢　婕，赵　欣，骞　宇，陈炼红，李　键，索化夷，*

（1.西南大学食品科学学院，重庆400715；2.西南大学国家食品科学与工程实验教学中心，重庆400715；3.重庆第二师范学院生物与化学工程系，重庆400067；4.西南民族大学青藏高原研究院，四川成都610041）

传统发酵牦牛酸乳宏基因组DNA三种提取方法比较研究

谢婕1，2，赵欣3，骞宇3，陈炼红4，李键4，索化夷1，2，*

（1.西南大学食品科学学院，重庆400715；2.西南大学国家食品科学与工程实验教学中心，重庆400715；3.重庆第二师范学院生物与化学工程系，重庆400067；4.西南民族大学青藏高原研究院，四川成都610041）

微生物区系复杂，自然环境中约95%是无法用常规的培养方法获得的，为了对未能培养或不可培养的微生物进行研究，本实验选用传统发酵牦牛酸乳，分别采用CTAB-SDS-冻融法、液氮研磨法、玻璃珠吸附法来提取宏基因组DNA，然后测得三种方法所提取的DNA的浓度、纯度和片段分布状况，并对总DNA进行16S rRNA基因片段PCR扩增。实验结果表明，本实验所采取的三种DNA提取方法均能提取到适于后续研究质量的DNA，但其中液氮研磨法同时具有提取的总DNA质量较好和步骤简单、成本低的优点，是提取牦牛酸乳宏基因组DNA最合适的方法。

微生物，传统发酵牦牛酸乳，宏基因组，DNA

牦牛在我国主要分布于四川省以及青藏高原地区，是高原地区牧民主要经济来源［1］。传统发酵牦牛酸乳中不仅含有丰富的蛋白质、必需氨基酸、脂肪、乳糖和矿物质［2］，还含有大量有益微生物，它们不仅能够提高食品营养价值、延长保存期，还可以改善食品的功能性质［3］，对人类健康起着至关重要的作用，正日益引起人们的重视。……