腰椎间盘组织髓核内IL—1、IL—6的表达及临床价值分析

穆国斌　徐国兴

[摘 要] 目的：探讨IL-1、IL-6对腰间盘突出的临床诊断价值。方法：腰间盘突出患者作为观察组，外伤致腰椎骨折患者作为对照组，评估神经根性疼痛VAS分值，检测2组患者椎间盘组织中的IL-1及IL-6的表达水平，并检测其相关性。结果：与对照组比较，观察组髓核组织的IL-1、IL-6含量均显著增高（P<0.05），同时观察组内IL-1、IL-6含量按照膨出型、突出型、游离型顺序依次增高，各型间比较，差异均有统计学意义（P<0.05）；不同髓核突出类型患者椎间盘组织中IL-1及IL-6的表达水平与神经根性疼痛VAS 评分呈显著正相关性。结论：IL-1、IL-6在腰间盘突出患者椎间盘组织中具有较高表达水平，可将其作为LDH临床诊断依据。

[关键词] 腰间盘突出；IL-1；IL-6；诊断价值

中图分类号：R683.2 文献标识码： B 文章编号：2095-5200（2015）05-089-03

腰椎间盘突出症（lumbar disc herniation，LDH）主要与椎间盘压力、椎间盘细胞或细胞外基质代谢异常、内分泌异常、免疫因素、外伤以及炎性介质等诸多方面具不同程度关联[1]。而新近有学者研究证实[2]，某些炎性侵入性细胞或突出椎间盘其髓核组织所自发产生多种细胞因子以及神经肽类物质均可导致非特异性炎症反应，同时这一过程也是诱发患者出现腰腿痛重要原因。另有几项研究初步表明[3-5]，白细胞介素-1（interleukin-1，IL-1）与白细胞介素-6（interleukin-6，IL-6）在颈椎及腰椎椎间盘退变组织中存在大量表达。鉴于此，我院针对近年内收治LDH患者连同对照患者开展研究，旨在通过检测其椎间盘组织中IL-1及IL-6表达水平情况及其与神经根性疼痛相关性，进而探讨其对LDH临床诊断价值，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选择于2013年6月～2014年7月期间我院收治并接受手术治疗47例LDH患者作为观察组，另选择同期在我院接受手术治疗外伤致腰椎骨折患者47例为对照组。2组患者均排除合并有椎管手术病史者、合并有与本研究实验相关免疫系统疾病者、合并有急慢性感染病史者，另外，对照组患者在受伤前均不患有LDH，腰椎正侧位医学影像检查未发现具腰椎间盘突出表现，同时术中也并未在腰椎骨折部位观察到有间盘突出等肉眼可见病理表现。观察组47例LDH患者包括男29例，女18例；年龄26～58岁，平均（43.8±8.3）岁；病程2～11年，平均（5.2±1.7）年；椎间盘突出节段包括：L3-44例，L3-426例，L3-417例；根据椎间盘突出程度可分为3组：膨出型13例，突出型20例，游离型14例。对照组47例腰椎骨折患者包括男28例，女19例；年龄25～59岁，平均（43.6±7.9）岁；受伤椎间盘节段包括：L3-45例，L3-424例，L3-418例。组间比较2组患者性别、年龄以及腰椎患病节段等基线资料均无统计学意义（P>0.05），具有在该层面上可比性。

1.2 方法

所有患者入院后即停用消炎止痛药物，并确保停药时间距手术时间至少不低于3d。在手术前夜采用视觉模拟评分法（VAS）先对患者神经根性疼痛程度进行评估。手术过程中指定同一名具有丰富经验医师进行取材操作，根据椎间盘突出程度进行椎间盘髓核组织处理，具体取材部位分别为：膨出型取突入椎管与神经根接触部分，突出型取突破纤维环及后纵韧带与神经根接触部分，游离型取游离到椎管内部分以及肉眼即可观察到存在退变部分。采用磷酸盐缓冲液（0.1M，pH=7）对取得髓核组织进行反复冲洗，将沾染血液洗净为止，吸干残留表面液体并行超声粉粹处理，粉粹后按100mg组织配1mL磷酸盐缓冲液制成均浆，均浆离心处理，离心转速5000r/min，离心时间10min，完成离心处理后取其上清液转移至试管内，储存到-20℃冰箱内保存待检。测定时先对样本进行复温处理，采用酶联免疫吸附法（ELISA）对样本IL-1及IL-6含量进行测定，测定试剂盒均采用美国ADL公司产品。

1.3 统计学方法

软件SPSS19.0处理本研究数据，其中，计量资料采用均数（x±s）标准差表示，检验方法采用t检验；IL-1、IL-6与神经根性疼痛程度VAS评分分值相关性采用Pearson相关分析法，以P<0.05为比较差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 2组患者髓核组织IL-1及IL-6含量测定结果

与对照组比较，观察组中膨出型、突出型、游离型三型患者髓核组织IL-1、IL-6含量均显著增高（P<0.05），且观察组按照膨出型、突出型、游离型依次增高，且各型间比较均有统计学意义（P<0.05）。见表1。

2.2 不同髓核突出类型IL-1、IL-6表达与疼痛评分相关性

不同髓核突出类型患者椎间盘组织中IL-1及IL-6表达水平与神经根性疼痛VAS 评分呈显著正相关性。见表2。

3 讨论

目前，普遍认为[6-7]LDH主要是由于患者腰椎间盘发生退行性改变，导致椎间盘突出并对神经根产生压迫引起临床症状，同时发现不少LDH患者其椎间盘突出程度以及对神经根所形成压迫程度实则与患者临床症状并非完全一致，而往往在手术中观察到神经根水肿，这与炎性改变非常相似。因此近年研究中，将炎性细胞因子归结成为了导致椎间盘退变关键性原因[8]。

IL-1为一种单核因子，IL-1可以发挥生物学效应比较广泛[9]，其在局部乃至全身均可发挥作用，包括增强免疫应答与促进伤口愈合，参与炎症反应。Doita等[10]曾对突出椎间盘样品开展有关免疫组化分析研究，发现在突出椎间盘肉芽组织单核细胞上观察到IL-1表达，继而认为IL-1可能主要是由单核-巨噬细胞所生成。TakahashiH等[11]研究发现，在不同类型突出椎间盘当中，其细胞因子分泌细胞有多不同，在脱出型与游离型椎间盘样本中，细胞一般为单核组织细胞、成纤维细胞以及内皮细胞等，而在膨出型椎间盘样本中则多是由软骨样细胞所生成。叶君健等[12]发现椎间盘发生退行性改变， IL-1水平随之升高，椎间盘其基质合成以及相关分解代谢生理活动均将出现紊乱，之后基质金属蛋白酶（MMPs）相关基因表达将明显增加，椎间盘出现基质分解代谢活动强度超过合成代谢强度病理性改变。IL-1还可诱导痛觉增敏以及神经根损害，在Cunha等[13]动物实验中，他们通过对小鼠前脚掌注入IL-1（包括IL-1α与IL-1β）后，很快就观察到小鼠出现较为明显痛觉增敏情况。有研究者采用基因扩增技术（PCR）观察到[14]，在炎性细胞因子存在情况下，突出腰椎间盘基质细胞中出现诱导型环氧合酶（COX2）mRNA表达，而COX2是一种对PGE2合成具有重要调节作用关键酶，PGE2生成量因此显著增加， IL-1通过对上调PGE2合成而进一步加重炎性反应效应。

IL-6为一种多效应细胞因子， Kang等[15] LDH患者髓核标本IL-6表现有非常高表达水平，超过200000ρg/mL，而在对照组中则几乎未检测到有IL-6存在。我国学者李新友等[16]则对不同类型突出椎间盘组织IL-6表达水平进行检测与观察，结果发现其每种类型突出椎间盘组织IL-6表达水平也是存在有较大差异，其中尤其以游离型显著增高。正常椎间盘组织自身具有抗原性，但又很有可能被免疫系统识别为“异物”，IL-6可通过调节免疫细胞功能促进椎间盘自身免疫反应，因此IL-6极有可能通过免疫反应这一环节间接加重LDH患者神经根损伤程度。

本研究结果提示IL-1、IL-6在LDH患者椎间盘组织中具有较高表达水平，可将其作为LDH临床诊断重要依据。

参 考 文 献

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