农杆菌介导的蓖麻转化体系优化

李伟 翟羽佳 李鹏程 王昌禄

（天津科技大学 食品营养与安全教育部重点实验室，天津　300457）

农杆菌介导的蓖麻转化体系优化

李伟 翟羽佳 李鹏程 王昌禄

（天津科技大学 食品营养与安全教育部重点实验室，天津300457）

针对影响农杆菌侵染效率的主要因素进行条件优化，确立了以OD600为0.8的菌液侵染、预培养5 d后的外植体为最佳侵染条件；侵染外植体经过5 d的共培养并除菌后，转到含有250 mg/L Kan的培养基中进行再生诱导，获得了多株具有Kan抗性的再生植株；通过在共培培养基中添加20 mg/L AS，124 mg/L Na2S2O3和152.4 mg/L DTT，有效地抑制了侵染后外植体的褐化现象，提高了筛选阶段抗性芽的成活率；对具有Kan抗性的再生植株进行PCR和Southern blot验证，共获得18株包含外源基因的阳性转化株。

蓖麻；农杆菌侵染；转化体系

蓖麻是世界十大油料作物之一，具有极高的经济价值和广泛的工业用途，是一种十分重要的工业油料作物。人们对蓖麻产业的重视直接导致蓖麻油需求量剧增，使得蓖麻原料供求关系极不平衡，而传统的育种方法又无法有效解决这一矛盾，于是越来越多的人开始将分子育种技术应用到蓖麻育种工作中［1］。

早期对蓖麻分子育种的研究主要包括蓖麻再生体系的构建，自1998年Sujatha Reddy［2］首次报道了更为稳定的再生体系后，以印度和美国为主的几家科研机构先后报道了以不同外植体配以不同的诱导条件构建的再生体系，我国也有很多针对国内蓖麻品种进行的体外再生研究，这些都为蓖麻实施分子育种奠定了良好的基础。……