李 蓉,冯 锋,*,陈泽忠,白云峰,郭芳芳,吴芳英,周 高
(1.山西大同大学化学与环境工程学院,山西大同037009;2.南昌大学化学学院,江西南昌330047)
基于磁性微球的免疫荧光法对癌胚抗原的检测
李 蓉2,冯 锋1,2*,陈泽忠1,白云峰1,郭芳芳1,吴芳英2,周 高2
(1.山西大同大学化学与环境工程学院,山西大同037009;2.南昌大学化学学院,江西南昌330047)
采用双夹心磁性微球免疫荧光显微法对样品中的癌胚抗原进行分离与检测。首先用EDC/NHS对磁性微球表面的羧基进行活化后偶联抗癌胚抗原单克隆抗体mAbCEA-C3制成免疫磁珠,再对样品中的CEA进行捕获,并进行免疫标记,最后用荧光显微镜进行检测。考察洗涤次数和免疫时间等因素对实验的影响,在最优条件下对CEA进行检测,结果表明:随着CEA浓度的增加荧光强度逐渐增强,检测限为9.67 ng/mL,可实现对CEA的定性和半定量测定。该方法操作简单快捷,样品用量少,选择性好,可应用于临床检验。
磁性微球;免疫荧光;癌胚抗原
癌胚抗原(Carcinoembryonic antigen,CEA)是一种广泛应用于胃肠道、乳腺癌和肺癌的肿瘤标志物,其分子量约为180 kDa[1]。CEA在正常人体内的含量约为2.5 ng/mL,在吸烟者体内的含量约为5.0 ng/mL[2]。当人体内的组织发生病变或癌变时,CEA的浓度就会升高。因此,建立一种简单、灵敏、快速、准确的CEA检测方法对肿瘤的鉴别诊断、病情检测及疗效评价等方面有重要的临床价值。
目前检测CEA的方法主要有电化学法[3-5]、荧光免疫法[6-8]、酶联免疫法[9]、化学发光法[10-12]。这些方法存在一些缺点,如前处理复杂、需要标记、检测时间较长等。……