磁性琼脂糖微球活化条件的研究

吴明慧 谭 坚 梁 晨

（广西梧州市环境监察支队，广西 梧州 543000）

磁性琼脂糖微球活化条件的研究

吴明慧 谭 坚 梁 晨

（广西梧州市环境监察支队，广西 梧州 543000）

对环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的活化条件进行了研究。以微球表面的环氧基密度为指标，考察了活化时间、NaOH浓度、环氧氯丙烷体积分数、NaBH4浓度和活化温度等因素对琼脂糖磁性微球活性的影响。实验结果表明，环氧氯丙烷活化琼脂糖磁性微球的最优条件为活化时间为4 h ，NaOH浓度为0.9 mol/L，环氧氯丙烷体积分数为40%，NaBH4的浓度为0.5 g/L，活化温度为40℃。

磁性琼脂糖；活化；影响因素；最优条件

磁性琼脂糖微球是一种用于蛋白质层析分离和细胞/酶固定化的载体，具有易分离回收、操作简便和成本较低等优点。磁性琼脂糖微球的活化度越高，能嫁接的亲和配基越多，悬浮吸附分离纯化蛋白质的效率就越高，更有利于扩大蛋白质生产规模[2]，因此提高磁性琼脂糖微球的活化度已经成为了研究的热点。目前，常用于载体活化的活化剂主要有环氧氯丙烷、1,4-二羟基正丁烷、双缩水甘油醚、羰基二亚胺、二乙烯基亚砜等[1]，其作用在于向载体表面引入高密度、稳定的活化基团，如氨基、环氧基、羟基、氯甲基、酰肼基等[2]。其中，环氧基是一种常用的活性基团，与其他基团相比，环氧基修饰的载体在直接固定化酶时不需要预活化，反应条件温和（温度 25℃，pH≥7.0），酶的活性在固定化过程中不易被破坏，适合固定化酶的工业化生产。此外，环氧基可与酶分子中的多种活性基团，如氨基、巯基及酚羟基、咪唑基等反应，在适合的条件下，酶与载体可发生多点键合，使得制备的固定化酶稳定性好，不易从载体上脱落。……