王男男,李岩松,孟星宇,周 玉,乔 斌,孙 宇,胡 盼,卢士英,任洪林,柳增善
(人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林大学动物医学学院,人兽共患病研究所,吉林 长春 130062)
芴完全抗原和多克隆抗体制备与鉴定
王男男,李岩松,孟星宇,周 玉*,乔 斌,孙 宇,胡 盼,卢士英,任洪林,柳增善
(人兽共患病研究教育部重点实验室,吉林大学动物医学学院,人兽共患病研究所,吉林 长春 130062)
以9-芴乙酸(fluorene-9-aceticacid,FLU)为原料,经活性酯法合成完全抗原FLU-牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)和FLU-卵清白蛋白(ovalbumin,OVA),偶联产物通过非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及紫外扫描法鉴定。使用FLU-BSA足垫免疫BALB/c小鼠获得多克隆抗体,间接酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测得多克隆抗体效价为51 200,间接竞争ELISA方法测得芴多克隆抗体的特异性,与荧蒽的交叉反应率为12%,与其他14 种多环芳烃交叉反应不明显。
9-芴乙酸;完全抗原;多克隆抗体;酶联免疫吸附实验
多环芳烃(polycyclic aromatic hydrocarbons,PAHs)是指分子中含有两个或两个以上苯环的碳氢化合物,可分为芳香稠环型及芳香非稠环型[1]。PAHs主要由石油、煤炭、焦油等矿物燃料及其他有机物不完全燃烧产生[2]。一些多环芳烃类化合物已被确定具有致癌、致突变、致畸形等有害作用[3],是受到广泛关注的污染物之一。食品中PAHs的污染一部分来源于食品产地环境如大气、水体和土壤的污染[4],另一部分则来源于烹饪过程如油炸、熏制和烧烤等[5]产生的污染。多环芳烃存在于食品中,严重影响人类的身体健康,因此,需要建立食品中PAHs的快速灵敏的检测方法。……