右旋糖苷修饰超氧化物歧化酶及其产物活性研究

2015-12-21 01:40:36赵有玺冀颐之北京联合大学生物化学工程学院北京0003
食品与机械 2015年3期

李 亮 赵有玺 冀颐之 龚 平(北京联合大学生物化学工程学院,北京 0003)

超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD),是一类广泛存在于生物体内的金属酶。因为能够催化超氧阴离子自由基发生歧化反应,己成为生化研究领域的热门课题。SOD在防辐射、抗衰老、消炎、抑制肿瘤及自身免疫治疗等方面显示出独特的功能[1],在医学、食品、化妆品等领域应用价值很大。不同介质中SOD活性的稳定性,是制约其应用的关键因素之一。常用的解决方法包括对SOD相关氨基酸残基进行化学修饰,水溶性大分子(如聚乙二醇、聚蔗糖和聚烯属烃基氧化物等)对SOD进行共价修饰,以及酶切改造等等$2-5%。

在牛血清白蛋白、月桂酸、褪黑素、不饱和脂肪酸、环糊精、羧甲基纤维素、肝素、卵磷脂等可用于修饰SOD的修饰剂[6,7]中,右旋糖苷作为一种具有良好的生物相容性和水溶性的天然大分子多糖,其糖链上的醛基经活化后可与酶蛋白分子上的游离氨基共价结合[8,9],是目前应用广泛的酶分子及蛋白质修饰剂之一。但关于其修饰SOD的报道较少[10]。

本研究拟采用右旋糖苷修饰SOD,通过紫外分光光度法测定修饰酶在高温环境、酸性、碱性以及有机溶剂条件下的酶活性稳定性变化,并采用红外光谱法确认修饰反应。旨在改善SOD在不同环境条件下的酶活稳定性,为SOD的应用提供试验数据。

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.1.1 材料与试剂

超氧化物歧化酶:植物来源,200IU/mg,北京经科宏达生物技术有限公司;

右旋糖苷:重均分子量(Mw)为1 500,国药集团北京化学试剂公司;……

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