靶向脐带间充质干细胞的构建及其在小鼠脾脏内的定位

秦力维，张宁坤，路　平，彭秀军，王桂琴，高　原，曹利群，崔　蓓， 郭建巍

(海军总医院1眼科，2心脏中心，3病理科，4检验科，北京　100048 )



靶向脐带间充质干细胞的构建及其在小鼠脾脏内的定位

秦力维1，张宁坤2，路平3，彭秀军1，王桂琴1，高原1，曹利群1，崔蓓1， 郭建巍4

(海军总医院1眼科，2心脏中心，3病理科，4检验科，北京100048 )

【摘要】目的构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体，用携带P1-GFP融合基因的慢病毒感染MSC，使MSC具有靶向性，将靶向MSC注入小鼠体内后观察MSC在小鼠脾脏的定位及与淋巴细胞的关系。方法用组织片贴壁法培养健康人脐带间充质干细胞，用基因工程技术构建含小分子肽P1-GFP融合基因慢病毒载体并感染人脐带间充质干细胞，通过尾静脉将转入P1-GFP融合基因的MSC注入小鼠体内，18 h后免疫组化染色观察GFP在小鼠脾脏的定位。 结果 培养的健康人脐带间充质干细胞生长良好，MSC感染含P1-GFP融合基因的慢病毒18 h后MSC开始出现绿色荧光，随着培养时间的延长，荧光强度逐渐增强，72 h达高峰。靶向MSC表达髓系干细胞的表面标记 CD105(90.0%)/CD44(98%),CD73(85.0%)/ CD90(98.5%)。将靶向MSC经尾静脉注入小鼠体内， 18 h后小鼠脾脏出现大量GFP阳性细胞，并与脾脏淋巴细胞密切接触。结论本研究成功构建了含P1-GFP融合基因的靶向MSC，靶向MSC成功定向脾脏，并与脾脏淋巴细胞密切接触，可用于后续的实验研究。

【关键词】靶向；脐带间充质干细胞；慢病毒；脾脏

Construction of targeted umbilical cord derived mesenchymal

间充质干细胞(mesenchymal stem cells，MSC)是来源于胚胎中胚层的一类成体干细胞，除具有向多胚层细胞分化、促进损伤修复、抗炎以及神经营养等功能外[1]，MSC还可减低以树突状细胞(dendritic cells, DC)DC为代表的单核巨噬细胞抗原递呈能力，具有免疫抑制作用[2]。……