登革2型病毒E基因DⅢ区的原核表达及血清学诊断应用

王金章 翁育伟 严延生

350001福州，福建省疾病预防控制中心福建省人兽共患病研究重点实验室

登革2型病毒E基因DⅢ区的原核表达及血清学诊断应用

王金章 翁育伟 严延生

350001福州，福建省疾病预防控制中心福建省人兽共患病研究重点实验室

目的表达登革2型病毒E基因DⅢ区重组蛋白并应用于血清登革病毒IgM抗体检测。方法构建包含登革2型病毒E基因DⅢ区片段的重组表达质粒，并在E．coli BL21（DE3）中表达，利用重组蛋白建立间接ELISA法用于血清登革病毒IgM抗体检测。结果成功构建重组表达质粒并表达重组蛋白，纯化的重组蛋白用于血清登革病毒IgM抗体检测，以IFTA作为参照标准，灵敏度为93.75%，特异度为91.25%；与Panbio Dengue IgM Capture ELISA试剂盒检测结果相比，二者具有较高的一致性（χ2＝0.214，P＞0.05；Kappa＝0.825）。结论在大肠杆菌中成功表达登革2型病毒E基因DⅢ区重组蛋白，并能够应用于血清登革病毒IgM抗体检测。

Fund programs：National High⁃tech R＆D Program of China（863 Program）（2011AA02A114）；National Science and Technology Major Project of China（2012ZA10004⁃210）；Fujian Provincial Medical Innovation Project（2015⁃CXB⁃13）

登革热（Dengue fever，DF）是一种经蚊媒传播的急性自然疫源性传染病。人体感染4种血清型的登革病毒（DENV）后多数病例症状和体征较轻，但少数病例可发展成为严重的、病死率高的登革出血热、登革休克综合征［1］。近年来随着商旅活动的频繁和全球气候条件的变化，DF病例不断扩散，已有128个国家和地区约39亿人口受到DENV的威胁［2］。自1978年我国广东省佛山市首次报告DF暴发疫情以来，近几十年DF在我国的分布范围逐渐扩大，但主要集中在广东、广西、福建、云南、海南等东南沿海地区［3，4］。由于DF的输入不确定性、突发性等原因易导致误诊、漏诊，从而导致疫情发现和处理不及时造成疫情的蔓延，因此，实验室检测结果成为发现DF疫情的关键，通过快速准确的早期检测技术及时发现并控制传染源是有效开展DF防治的重要基础［5］。……