改良Frey氏液体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究

朱真，万建青，杨挺英，康凯

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

改良Frey氏液体培养基质控菌株菌种代次与生长曲线研究

朱真，万建青*，杨挺英，康凯

(中国兽医药品监察所，北京 100081)

为探究改良Frey氏液体培养基质控菌CVCC2960滑液支原体(以下简称MS)生长规律，本试验首次同时采用CFU计数、CCU测定和pH值测定的方法，比较不同接种浓度、接种体积和不同代次MS生长情况。结果显示：5%与10%接种量的CCU测定结果峰值差异不明显，但5%接种的CFU计数峰值更高，pH下降更慢；1～5代菌在生长曲线各阶段的测定结果均无明显差别；3种不同接种方式的测定结果显示，用0.5 mL菌液接种9.5 mL培养基的方式更利于MS生长。本试验为改良Frey氏液体培养基的质控标准化提供依据。

滑液支原体；培养基质控；菌种代次；传代

支原体污染是生物制品常见的污染源，给科研、疫苗生产及生物制品产业带来许多麻烦，《美国药典》、《欧洲药典》及《中国兽药典》二〇一〇年版三部中均有使用培养法进行生物制品支原体检查的专题论述[1-3]，《中国兽药典》二〇一〇年版三部规定滑液支原体、猪鼻支原体分别为支原体检验用培养基支原体改良Frey氏培养基、支原体培养基质控菌株[3]。通过测定不同培养时段的CCU，绘制出的MS生长曲线表明：其迟缓期为培养后6 h内，对数期为6～36 h，稳定期为 36～54 h，衰老期为54 h之后[4]。而通过测定不同培养时段的CCU可以发现，MS培养过程中活菌浓度上升伴随着pH值的降低，且pH值为6.9时浓度达到最高[5],但同时用以上三种方法对滑液支原体进行生长曲线研究国内尚未见报道。……