桔梗皂苷D对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗肺癌细胞活性的影响

章艳斐

桔梗皂苷D对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体抗肺癌细胞活性的影响

章艳斐

目的探讨中药活性成分桔梗皂苷D对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体（TRAIL）抗肺癌细胞活性的影响及其机制。方法将人肺癌细胞系A549分为对照组、桔梗皂苷D组、TRAIL组及桔梗皂苷D联合TRAIL组，MTT法检测A549细胞活力，Annexin V/PI染色检测A549细胞凋亡，免疫共沉淀法检测A549细胞RIP1-FADD-caspase-8复合物的形成，Western blot法检测A549细胞caspase-8的活化。结果对照组、桔梗皂苷D组、TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL组对A549细胞活力的抑制率分别为0、（7.6±0.7）%、（13.4±1.0）%、（60.3±4.2）%，桔梗皂苷D组、TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL组的细胞活力抑制率与对照组比较差异均有统计学意义（P＜0.05）。对照组、桔梗皂苷D组、TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL组对A549细胞凋亡的诱导率分别为（1.6±0.2）%、（4.5±0.3）%、（7.2±0.5）%、（40.2±2.8）%，TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL组的细胞凋亡率较对照组有明显提高（P＜0.05）。桔梗皂苷D+TRAIL组A549细胞内的RIP1-FADD-caspase-8复合物水平及caspase-8的活化程度显著提高。RIP1 siRNA及z-IETD-fmk能显著抑制桔梗皂苷D对TRAIL的协同作用。对照组、桔梗皂苷D+TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL+RIP1 siRNA组、桔梗皂苷D+TRAIL+z-IETD-fmk组对A549细胞活力的抑制率分别为0、（61.2±5.0）%、（24.5±1.9）%、（17.5±1.7）%，与桔梗皂苷D+ TRAIL组比较，桔梗皂苷D+TRAIL+RIP1 siRNA组、桔梗皂苷D+TRAIL+z-IETD-fmk组的细胞活力抑制率明显降低（P＜0.05）。对照组、桔梗皂苷D+TRAIL组、桔梗皂苷D+TRAIL+RIP1 siRNA组、桔梗皂苷D+TRAIL+z-IETD-fmk组对A549细胞的凋亡诱导率分别为（1.8±0.2）%、（39.5±2.6）%、（12.3±1.1）%、（9.4±0.8）%，与桔梗皂苷D+TRAIL组比较，桔梗皂苷D+TRAIL+RIP1 siRNA组、桔梗皂苷D+TRAIL+z-IETD-fmk组的细胞凋亡率明显降低（P＜0.05）。结论桔梗皂苷D可能通过促进死亡受体复合物的形成，增强TRAIL对肺癌细胞的凋亡诱导效应。

人肺癌细胞系A549；桔梗皂苷D；TRAIL；caspase-8；凋亡

肺癌是危害人类健康的世界性难题，死亡率居所有恶性肿瘤的首位，我国肺癌的5年存活率不足15%[1]。肿……