对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系

李提，方硕，余铃，杨俭，郭卫春

(武汉大学人民医院，武汉430060)

·论著·

对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系

李提，方硕，余铃，杨俭，郭卫春

(武汉大学人民医院，武汉430060)

目的 探讨对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性变化及其与Notch信号通路的关系。方法取对数生长期的对顺铂耐药的人骨肉瘤143B-TK细胞作为观察组，以未经顺铂作用的人骨肉瘤143B-TK细胞作为对照组。采用实时荧光定量PCR法检测两组干细胞相关基因(TERT、Sox2、Oct4、NANOG)、Notch信号通路相关基因(HeyL、Hey2、Hey1、Hes5、Hes1)mRNA相对表达量；两组加入或不加入Notch信号通路特异性抑制剂DAPT，采用悬浮克隆球试验检测成球能力(以悬浮克隆球数量表示)。结果两组NANOG、Hey2 mRNA相对表达量比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。观察组TERT、 Sox2、Oct4、HeyL、Hey1、Hes5、Hes1 mRNA相对表达量均高于对照组(P<0.05或<0.01)。不加入DAPT的观察组悬浮克隆球数量明显多于加入DAPT的观察组和不加入DAPT的对照组(P均<0.01)。结论对顺铂耐药的骨肉瘤细胞干细胞特性增强；Notch信号通路激活可能是导致其干细胞特性增强和细胞耐药的主要原因。

骨肉瘤；顺铂耐药；肿瘤干细胞；Notch信号通路

顺铂是骨肉瘤患者的常用化疗药物，具有广谱的抗肿瘤活性，能够在DNA链内交联相邻嘌呤，抑制转录，最终导致细胞死亡[1，2]。大多数骨肉瘤患者在顺铂化疗初期效果较好，但部分患者最终因获得性耐药导致肿瘤复发和转移，而顺铂耐药的潜在机制目前仍不清楚。Notch信号通路是一种调节细胞存活、增殖、分化和凋亡的保守信号系统，包括4个受体(Notch 1～4)和五个结构相似的配体(jagged 1、jagged 2、delta-like 1和 delta-like 1、3 或4)[3]。当Notch受体与配体结合，γ-分泌酶复合物将切割Notch胞内结构域(NICD)，调节下游靶基因如Hes1、Hes5、HeyL、Hey1和Hey2的表达。Notch信号通路失调可能导致肿瘤细胞向恶性转化[4，5]。但其在骨肉瘤恶性发展和顺铂耐药中的作用尚不明确。2……