口蹄疫病毒VP1蛋白可溶性表达标签筛选

舒静超，李赛赛，申欢欢，郭豫杰(河南农业大学/农业部动物生化与营养重点开放实验室，河南 郑州 450002)

口蹄疫病毒VP1蛋白可溶性表达标签筛选

舒静超，李赛赛，申欢欢，郭豫杰*
(河南农业大学/农业部动物生化与营养重点开放实验室，河南 郑州 450002)

为了提高口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达，根据A型口蹄疫病毒核酸序列设计并合成了口蹄疫病毒VP1片段，将其克隆到pET21b(+)载体上，设计1对通用引物扩增10个融合标签Grifin、GST、NusA、SUMO、Thioredoxin、ProteinG、γ-crystallin、ArsC、PpiB、MBP，并分别将扩增的融合标签与VP1连接构建重组质粒，将重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)，0.5 mmol/L IPTG诱导其表达。SDS-PAGE结果表明，MBP、Grifin和GST能够促进口蹄疫病毒VP1蛋白的可溶性表达，其中MBP与VP1融合表达蛋白可溶部分占60%；Western blot鉴定分析结果显示，小鼠抗His标签单克隆抗体能识别表达的重组蛋白。表明成功表达了具有免疫学活性的融合蛋白MBP-VP1。

口蹄疫病毒； VP1蛋白； 可溶性； 融合标签

口蹄疫(foot-and-mouth disease，FMD)是由口蹄疫病毒引起的偶蹄动物烈性接触性传染病，主要危害牛、羊、猪等，发病率极高，传播速度极快，易造成严重的经济损失，世界动物卫生组织将其列为A类传染病之首，我国农业部也将其划定为一类动物传染病[1]。口蹄疫病毒(foot-and-mouth disease virus，FMDV)属于小RNA病毒科(Picomaviridae)、口蹄疫病毒属(Aphthovirus)，有7个血清型，包括A型、O型、C型、Asia l型、SAT 1型、SAT 2型和SAT 3型等血清型，其中O型、A型口蹄疫在世界范围内分布广泛，近年来A型口蹄疫的流行范围和暴发频率呈现扩大和增强的趋势。目前已知的FMDV各型之间没有交叉免疫保护性。根据国家口蹄疫参考实验室疫情监测结果，我国目前主要流行O型和A型2个血清型，2013—2014年我国共报道发生A型疫情22次，疫情主要分布于广东、新疆、西藏、青海、云南和江苏等6个省(自治区)[2]。……