脱氢枞胺对氟苯甲醛激活JNK/P38通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

刘 玲，黄紫乐，何 玲

（1.河南科技大学医学院药学系，河南洛阳 471003；2.中国药科大学药理学教研室，江苏南京 210009）

脱氢枞胺对氟苯甲醛激活JNK/P38通路诱导人肝癌HepG2细胞凋亡

刘 玲1，黄紫乐1，何 玲2

（1.河南科技大学医学院药学系，河南洛阳 471003；2.中国药科大学药理学教研室，江苏南京 210009）

目的研究脱氢枞胺对氟苯甲醛（DHAA-F）对人肝癌HepG2细胞存活的影响，探讨其诱导细胞凋亡作用机制。方法 用不同浓度DHAA-F处理HepG2细胞24，48和72 h，CCK-8法检测细胞存活；DHAA-F 20，40和 80 μmol·L-1处理 HepG2细胞 24 h，荧光显微镜观察细胞形态的变化，Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡，Western蛋白印迹法检测凋亡相关蛋白BCL-2、BAX、活化的胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3蛋白表达水平，以及丝裂原激活蛋白激酶（MAPK）家族中ERK，JNK和P38蛋白的表达。结果 与细胞对照组比较，DHAA-F可显著抑制细胞存活（P＜0.01），24，48和72 h的IC50值分别为56.8±4.4，40.2±3.4和24.2±2.4 μmol·L-1；DHAA-F 20，40和80 μmol·L-1作用24 h后，核固缩程度加深，PI染色增多，细胞凋亡率明显增加（P＜0.01），由细胞对照组的（6.4±0.6）%分别增加至（12.3±1.7）%，（28.8±3.2）%和（61.8±4.6）%；DHAA-F可以增加HepG2细胞中JNK和P38蛋白的磷酸化（P＜0.01），引起BCL-2表达下调（P＜0.01）、BAX及活化的胱天蛋白酶9和胱天蛋白酶3表达上调（P＜0.01）；与DHAA-F组相比，P38MAPK抑制剂SB203580和JNK抑制剂SP600125可逆转DHAA-F引起的BCL-2表达下调、BAX表达上调和胱天蛋白酶3的活化（P＜0.01）。结论 DHAA-F可通过激活JNK/P38通路诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡。

脱氢枞胺对氧苯甲醛；丝裂原活化蛋白激酶；细胞凋亡；肝细胞癌

目前，我国肝癌发病人数约占全球肝癌患者的55%，其发病率和死亡率在不断升高。据最新统计，全世界每年新发肝癌患者约60万，居恶性肿瘤的第5位，已经严重威胁人们的健康和生命［1］。目前肝癌治疗方式包括手术切除、介入化疗及靶向分子药物治疗等，其中手术切除是肝癌的主要治疗手段，而术后高转移率和高复发率是影响肝癌预后的主要因素。……