王勇 曹艳杰 张文革
摘要:为了提高放线菌BOS-018代谢产物中有效代谢物质浓度,得到更多的活性成分,并提高其抑菌活性,采用响应面法来优化放线菌BOS-018的液体发酵条件。先通过单因素试验确定最佳单因素,再运用Plackett-Burman试验对影响发酵的几个因素进行评价并筛选出3个最主要因素,即温度、接种量和装液量。经最陡爬坡试验,最后运用Box-Behnken设计得到这3个因素的最佳值为:温度27.74 ℃,接种量13.26 mL,装液量102.07 mL。优化后,抑菌圈直径达到22.12 mm,相对于优化前提高36.7%。
关键词:放线菌;发酵优化;响应面法;Plackett-Buman试验;最快爬坡试验;Box-Behnken试验
中图分类号: TQ920.6文献标志码:
文章编号:1002-1302(2016)08-0458-03
放线菌具有非常高的经济价值,能产生多种多样的抗菌物质。到目前为止,食品、工业、医药和农业上有许多成功的抗生素的使用实例[1]。从放线菌中提取有效的抗菌物质来抑制黄瓜枯萎病成为一条安全、有效的途径,放线菌BOS-018的次级代谢产物对黄瓜枯萎菌有较明显的抑制作用。放线菌发酵培养基和发酵条件的优化是工业生产中非常重要的,是从实验室到工业生产中不可缺少的环节[2]。响应面法在试验设计中是一种常用方法,准确、高效且分析性强[3-4]。本实验运用响应面法中的Plackett-Burman设计、最陡爬坡试验、Box-Behnken设计来对BOS-018菌株的培养基配方和培养条件进行优化,应用Design-Expert.V.8.0.6軟件对条件进行二阶数值模型分析,获得回归方程,效果显著[5]。
1材料与方法
1.1材料
1.1.1菌株供试菌株:放线菌菌株BOS-018 (从长白山针叶林土壤中分离、筛选并保存)。指示菌株:黄瓜枯萎病菌,由辽宁科技大学生物工程实验室提供。……