绵羊母羔多胎基因（FecB）检测技术应用要点*

张云生*，姚晓鹏，周平，王新华，刘守仁

（1.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，新疆石河子832000；2.新疆惠达农牧业科技有限公司）

绵羊母羔多胎基因（FecB）检测技术应用要点*

张云生1*，姚晓鹏2，周平1，王新华1，刘守仁1

（1.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，新疆石河子832000；2.新疆惠达农牧业科技有限公司）

小片断法高分辨率熔解曲线（SA-HRM）技术检测绵羊多胎FecB基因具有准确、高效、自动化程度高等特点，可以在短时间内实现大规模群体多胎基因检测的目的。近两年已推广应用于兵团和自治区的多家肉羊养殖场及育种场的8 000多只绵羊，明显提高了多胎绵羊及其杂交后代的产羔率，产生了显著的经济效益，是目前多胎绵羊养殖过程中不可缺少的关键性技术。为尽快利用本项技术为新疆及兵团肉羊产业发挥提质增效作用，本文就SA-HRM基因分型技术在肉羊养殖实际生产中的推广应用经验及要点进行了概述。

绵羊；母羔多胎鉴定；FecB；SA-HRM

绵羊属单胎哺乳类动物，但有些绵羊品种却具有能够稳定遗传的多胎性状，FecB基因是目前已知的绵羊高繁殖力主效基因。我国的小尾寒羊和湖羊的产羔率分别为270%、250%，其携带的多胎FecB基因是决定个体多胎性状的主要因素。在小尾寒羊、湖羊的杂交后代群体中，均能检测到携带多胎FecB基因的个体，多胎FecB基因纯合型（BB）母羊个体产羔率约为250%，杂合型（B+）母羊个体产羔率约为200%，因此，通过多胎基因检测鉴定，可有效区分纯合型（BB）、杂合型（B+）以及野生型（++）的母羊个体[1]，以检测结果为依据对生产母羊群体实行多胎性能整群，将有效、精准的增加群体的繁殖力，可快速提高兵团肉羊业的生产水平和科技含量。

利用小片断法高分辨率熔解曲线（SA-HRM）技术我们成功建立了简单、快速、准确的绵羊多胎FecB基因鉴定技术体系。在肉羊养殖实际生产中，很短时间内就可实现大规模绵羊群体多胎性检测。采用本项技术能够实现绵羊母羔早期多胎性状鉴定，最早在母羔出生后1月龄以内，就可采血鉴定多胎FecB基因，在生产实际中提前2年就能完成对生产母羊个体的多胎性选留，对未携带多胎FecB基因的羔羊及时淘汰育肥，可以节省约2年的饲养管理成本[2]。及时鉴别现有生产母羊群体中个体间多胎性能差异，尽早淘汰产单胎的母羊个体，使多胎生产母羊群保持较高水平的繁殖性能，达到止损、增效的目的。目前，新疆从山东、江苏、浙江引进的小尾寒羊和湖羊纯种群体中有5%～10%的母羊个体未携带多胎FecB基因；而从内蒙、甘肃引进的小尾寒羊、湖羊杂交后代中约有25%的母羊个体未携带多胎FecB基因，使群体多胎性能大大降低，利用绵羊多胎FecB基因检测技术及时淘汰低产个体，有利于节省成本，有效降低多胎肉羊养殖风险。

1　样品采集要求

1.1绵羊个体选择

多胎基因检测对象主要为小尾寒羊、湖羊个体，以及其杂交后代绵羊个体，不针对山羊样品进行检测；要求被检测的公、母羊个体康健，无人畜共患疾病（如结核、布鲁氏杆菌病等）；大、小羊只常年均可采样进行送检。

1.2样品采集

用含抗凝剂的采血管采集血液样品3～4 mL，将血液样品颠倒混匀6～8次，确保血液与抗凝剂充分混合、不发生凝血；记录羊耳号和对应的血样号，不同的样品之间不能相互污染；样品采集后及时放入-20℃保存；4℃条件下运输，24 h内到达不影响检测结果。

1.3多胎基因检测

被送检样品要求样品号标记准确、字迹清晰；采样管上的号应与记录号一致；样品保存完好，无破损和渗出；无变质、降解情况发生。

2　多胎基因检测步骤

2.1仪器及试剂

LightCycler 480Ⅱ荧光定量PCR仪（德国罗氏），Taq DNA聚合酶、10×Buffer、dNTP（天根生物技术有限公司生产），引物由上海英潍捷基生物技术有限公司合成。

2.2多胎基因扩增程序

PCR扩增程序：95℃预变性3 min；95℃30 s，55℃60 s，循环数为35次。HRM分析程序：95℃变性5 min，40℃冷却2 min；75～95℃收集荧光信号，每秒钟收集25次信号。利用LightCycler 480自带软件分析数据。

2.3FecB基因检测与产羔情况分析

利用绵羊多胎基因检测技术，可实现公、母羊多胎基因纯合型（BB）、杂合型（B+）的精准选配，能够大量、稳定生产携带有多胎FecB基因的杂交后代。头胎有50%的个体产单羔，2～6胎产双羔；多胎母羊在配种前要保证足够的营养供给，维持良好的体况；在多胎母羊妊娠3～4个月和产羔后需要加强营养，以满足母羊妊娠及哺乳双羔对营养的需求。

3　经济效益

3.1节约成本

利用多胎基因检测技术，选择多胎性好的种公羊个体，通过多胎杂交导入提高群体中多胎FecB基因的比例，使群体的产羔率增加，有效增加群体的繁殖性能，节省大量引进多胎生产母羊的费用；对羔羊进行早期鉴定，提前2年进行后备母羊的选留，节省大量的饲养管理成本。

3.2增收增效

应用绵羊多胎基因检测技术和精准选配技术，实行种公羊、生产母羊的个体选留和选配，将提高群体产羔率30%～50%，每只羔羊净利润按300元计算，以户均养殖母羊100只计算，每年增加的净收益为1.2万元，经济效益十分可观。绵羊多胎基因检测技术的应用和实施，有效提高了农区和半农半牧区肉羊养殖的生产效益，也为羔羊育肥、羊肉加工企业提供了更多的羊源，增加了市场上羊肉的供给，有效缓解羊肉价格上涨。

4　注意事项

（1）对检测为携带多胎FecB基因的绵羊个体，同时需要参考其它性状，如体格大小、产肉、泌乳等性能，从而综合评价个体生产性能，决定个体的生产利用价值；（2）在舍饲饲养条件下，多胎生产母羊群能够充分发挥高繁殖力特性，羔羊成活率也会得到很大提高。

[1]张云生，京勇.新疆建立绵羊分子育种和繁育体系的研究分析，草食家畜，2014，169（6）：15-21.

[2]张云生，张万顺.阿寒多胎杂交羊群体生产性能初步研究，新疆农垦科技，2016，39（2）：32-34.

声明

本刊2015年第10期第57页“膜下滴灌盐碱土改良剂在棉花上的应用研究”一文的作者“张德林”应为“张得林”，特此声明。

《新疆农垦科技》编辑部

2016—09—27

兵团重大科技项目“良种肉羊繁育与杂交配套技术体系集成与示范”（2013AA003-001）；兵团国际科技合作计划项目“基于血浆DNA开发牛、羊妊娠诊断及FecB基因高效分型技术研究”（2014BC003）。

张云生（1976-），男，副研究员，博士，研究方向为绵羊育种。E-mail：xmszys@163.com。