牛血清白蛋白荧光猝灭法测定甲紫含量

周谢海， 张　龙， 杨　兰， 程煜凤， 李改茹

(新疆医科大学药学院， 乌鲁木齐　830011)



·药学研究·

牛血清白蛋白荧光猝灭法测定甲紫含量

周谢海， 张龙， 杨兰， 程煜凤， 李改茹

(新疆医科大学药学院， 乌鲁木齐830011)

摘要：目的建立基于牛血清白蛋白(BSA)荧光猝灭测定甲紫(MV)含量的荧光分析法。方法选择激发波长为279 nm，发射波长为340 nm，MV与BSA相互作用使其内源性荧光产生猝灭，荧光强度的下降值△I与MV浓度呈线性相关，标准曲线法测定甲紫溶液中MV的含量。结果△I与MV的浓度在2 ~10 μg/mL内呈线性关系，△I=11.709C+0.95(r=0.999 2)，加样回收率为97.3%~100.1%，RSD为0.24%~1.7%。3批次医用甲紫溶液中MV的平均含量分别为1.016%、1.011%、1.029%，与标示量一致。结论该法操作简便，灵敏度高，结果准确，可用于低含量甲紫样品的测定。

关键词：荧光猝灭法； 牛血清白蛋白； 甲紫； 含量测定

甲紫(Methyl violet, MV)又名龙胆紫、甲基紫，三苯甲烷类芳香族染料，其溶液稀释后可用作外用药品(紫药水)，是皮肤科常用制剂[1]。由于其既可以杀死某些浅表真菌，又可以杀死细菌，因此常作为水产养殖抗真菌添加剂，具有较好的效果[2]。然而MV具有致癌、致畸、致突变等毒副作用，所以许多国家将其列为水产养殖的禁用药物，也成为药物残留监控的主要内容之一[3-4]。《中华人民共和国药典》(2015版)对皮肤科外用甲紫溶液的质量控制方法是重量分析法[5]。该法操作繁琐，耗时长，灵敏度低。血清白蛋白是人和动物血浆中含量最丰富的重要蛋白，具有特殊位点，能与许多金属离子、药物分子和小分子染料产生特异性结合[6-7]。研究表明，MV可通过疏水作用与牛血清白蛋白(BSA)结合，使BSA内源性荧光猝灭，且这种猝灭作用随甲基紫浓度的增大而增强[8]。……