刘兴晖,徐凤霞,宋惠,鲁作华,沈振华
(上海市浦东新区公利医院检验科,上海 200135)
乙型肝炎病毒对SOX4表达的影响及其机制探讨
刘兴晖,徐凤霞,宋惠,鲁作华,沈振华
(上海市浦东新区公利医院检验科,上海 200135)
目的 观察乙型肝炎病毒(HBV)对SOX4表达的影响,并探讨其机制。方法RT-PCR和Western印迹法检测HepG2和HepG2.2.15细胞中SOX4 mRNA和蛋白表达的差异,将HBV感染性克隆pHBV1.3及其空载体分别与含SOX4基因启动子的报告质粒pGL3-SOX4共转染HepG2细胞,测定荧光色素酶的活性,RT-PCR和Western印迹法分别检测SOX4 mRNA和蛋白表达的情况。结果HepG2.2.15细胞中SOX4 mRNA和蛋白的表达水平明显高于HepG2,HBV能够激活SOX4基因启动子的活性,并在mRNA和蛋白水平上调SOX4的表达。结论HBV能够在转录和翻译水平上调SOX4的表达。
乙型肝炎病毒;SOX4;启动子;表达
原发性肝细胞癌(HCC)是世界上最常见的恶性肿瘤之一,严重危害人类健康。我国是世界上HCC死亡率最高的国家,占世界上肝癌总死亡人数的53%[1]。乙肝病毒(HBV)感染是HCC的主要诱因之一,但其致病机制不明。SOX基因家族是一类在HMG基因保守区与性别决定基因(SRY)有60%以上同源性的编码转录因子的基因总称,SOX4基因属于该成员中的C亚族,在肿瘤的发生和发展中发挥重要作用[2]。本研究主要观察HBV对SOX4的调节作用,并初步探讨其调节的分子机制,为揭示HBV致HCC奠定一定的基础。
1.1 材料 HepG2和HepG2.2.15细胞系及HBV感染性克隆pHBV1.3由本室保存[3];Trizol R和转染试剂Lipofectin2000购自Invitrogen公司;M-MLV逆转录酶和荧光色素酶底物购自Promega公司;含SOX4基因启动子的报告质粒pGL3-SOX4由本室构建;抗人SOX4单克隆抗体购自Santa Cruz公司。
1.2 方法……