芽囊原虫—一种可能的肠道病原体

翁善钢

（外高桥出入境检验检疫局，上海浦东新区200137）

芽囊原虫—一种可能的肠道病原体

翁善钢

（外高桥出入境检验检疫局，上海浦东新区200137）

猪腹泻性疾病是如今养猪业具有重要经济意义的疾病。引起腹泻的病原体有多种，包括细菌、病毒、寄生虫等。本文将主要介绍奥地利出现的一个腹泻病例。

2015年3月，奥地利的一个猪场出现了一例芽囊原虫（blastocystosis）病。这个猪场的仔猪产自存栏60头母猪的封闭生产系统。仔猪在第28天断奶。母猪常规接种细小病毒病和猪丹毒疫苗，仔猪接种圆环病毒病和支原体肺炎疫苗。猪场没有其它可知的疾病信息。猪场兽医称，仔猪断奶之后出现腹泻，体重随之下降，并未观察到其它明显的临床症状，仔猪死亡率为5%。猪场采取了多种措施，如使用抗生素、调整饲料配方（把粗蛋白质从18%降低到15%，粗纤维从3%增加到4%），不过这些措施并没有效果。

1 临床检查和诊断

一头使用黏菌素[5毫克/（千克体重·天），连续7天]治疗的仔猪被送往奥地利的一家大学猪病诊所进行诊断。这头仔猪患有严重的腹泻，临床检查仅发现轻度的营养不良。对仔猪进行剖检及病理组织学检查，同时对一段空肠单独进行了细菌学检查。将腹泻粪便样本装满试管以确保满足厌氧条件，立即送到研究所的细菌学实验室进行短螺旋体培养。为了排除圆环病毒2型相关的肠炎，用福尔马林固定的肠道组织样本进行原位杂交试验以直接检测肠道内的圆环病毒2型。使用三重PCR检测回肠和结肠黏膜样本的胞内劳森氏菌、短螺旋体和肠道螺旋体。对粪便进行荧光显微镜检查和传统的光学显微镜检查以检测球虫卵囊和原生动物。

2 病理学检查结果

未观察到明显的病理形态学变化。结肠消化物呈浅绿色液体状。病理组织学检查可见小肠黏膜有数个嗜酸性粒细胞。圆环病毒2型原位杂交试验和三重PCR未检测到胞内劳森氏菌、短螺旋体和肠道螺旋体。

3 细菌学检测结果

空肠可见稀薄的类似于酵母的真菌和大肠杆菌。由于大肠杆菌在空肠的检出率较低，故认为临床相关性较低，未能确定致病因子。细菌培养未检测到短螺旋体。

4 寄生虫学检测结果

通过荧光显微镜法未检测到球虫虫卵。检测到猪结肠存在一定量的肠袋虫杆菌（考虑为猪结肠本身存在的）。传统光学显微镜检测仔猪粪便可见大量圆形结构体，大小为10～20微米。这些圆形结构体呈现透明状，没有或几乎没有细胞内物质。

为了进一步确定圆形结构体，用传统的迪夫快速（Diff-Quick）染色试剂盒对粪便涂片进行染色。在100倍放大的情况下，圆形结构体在光学显微镜下呈现为单细胞，主要为嗜碱性结构体。检测人员认为通常在猪粪便中不会发现如此数量的该结构体，因此认为其是新的事物。检测人员向多位病理学家、细菌学家和寄生虫专家咨询，一名微生物学家最终作出诊断称这种结构体为芽囊原虫属（Blastocystis sp）。

5 结果分析

鉴于未检测到一定数量的临床常见肠道病原体，大量的芽囊原虫感染被认为在此病例中起到了关键的作用。芽囊原虫是一种原生动物，经常在人类和其它动物中发现，如猪和牛。其细胞被细胞膜包裹且主要由一个大的中央液泡构成，细胞核位于细胞的周围。芽囊原虫的首次报道出现在1911年，但其发病机理和致病性目前尚未完全了解。猪的结肠可以发现一定量的芽囊原虫。现有的研究调查显示，在猪只受到免疫抑制的情况下，芽囊原虫不仅在结肠定植还可以在小肠内定植。人类和猪均很少观察到小肠组织的病变。

在此病例中，霉菌毒素造成的免疫抑制可能是芽囊原虫在仔猪肠道大量定植的原因。2014年，在欧洲中部有大量的玉米存在霉菌毒素污染，特别是毒素A和B类单端孢霉烯族毒素。脱氧雪腐镰刀菌烯醇（DON）属于B类单端孢霉烯族毒素，T2毒素属于A类单端孢霉烯族毒素，它们都具有严重的免疫抑制作用。鉴于大量玉米含有高浓度的霉菌毒素，研究人员建议猪场在饲料中完全禁止使用玉米。研究人员认为霉菌毒素（特别是T2毒素和DON）是导致免疫抑制的化合物，其帮助了芽囊原虫在肠道的定植。这一因素加上卫生和消毒程序管理不善可能造成芽囊原虫污染了猪舍，故影响到后续几个批次的猪。

6 预防和治疗

芽囊原虫的治疗非常困难，因对其有效的可用药品非常有限。甲硝咪唑是首选药物，但在欧洲已不允许其在食品动物中使用了。其它咪唑类药物如替硝唑和酮康唑也不允许使用。

唯一合法的治疗芽囊原虫的方法是口服甲氧苄氨嘧啶-对氨基苯磺酰胺（TMP/STX），或者饮水加入巴龙霉素。巴龙霉素是氨基糖苷类抗生素，不能被全身充分吸收，一旦给药，此药物停留在肠道内腔内且随粪便排出。在人药中，巴龙霉素用于治疗芽囊原虫病、隐孢子虫病、阿米巴病和皮肤利什曼病。

在此病例中，饲料中添加TMP/STX治疗腹泻，但这对该病症未起到改善作用，故猪场兽医决定使用巴龙霉素治疗（40毫克/千克体重，连续使用10天）。

单独使用抗生素治疗芽囊原虫病并不能起到很好的效果。通常应该与管理措施联合使用，如彻底的清洁和消毒程序。

数月后，该猪场的临床状况显著改善。在3个生产批次使用了巴龙霉素，治疗的批次未发现腹泻现象，且死亡率降低到小于1%。由于使用巴龙霉素治疗断奶仔猪的成本很高，猪场兽医停止使用抗生素治疗，转而在感染猪的饲料中添加氧化锌（2 500毫克/千克）和木炭。

总之，芽囊原虫必须加入到猪腹泻病例的鉴别诊断名单上，特别是在玉米等粮食作物大量被霉菌毒素污染的年份更应如此。实验室应扩大诊断面，当猪严重腹泻时还应检查猪粪便中的芽囊原虫。

（编辑：柳青）

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2016-03-17

翁善钢（1985-），男，江苏常熟人，硕士，主要从事各类动物疫病流行病学及其防控对策研究.E-mail：sgweng@163.com