FrzA基因转导干预对大鼠体外缺血缺氧心肌细胞Wnt信号通路相关分子表达及细胞凋亡的影响

李华垠，陶静，马依彤，刘芬，陈邦党

(1新疆医科大学第一附属医院，乌鲁木齐 830054；2新疆心血管病研究重点实验室)



FrzA基因转导干预对大鼠体外缺血缺氧心肌细胞Wnt信号通路相关分子表达及细胞凋亡的影响

李华垠1，2，陶静1,2，马依彤1,2，刘芬2，陈邦党2

(1新疆医科大学第一附属医院，乌鲁木齐 830054；2新疆心血管病研究重点实验室)

目的探讨重组9型腺相关病毒(rAAV9)携带FrzA基因转导对心肌细胞缺血缺氧模型Wnt信号通路活性的抑制作用及心肌细胞凋亡的影响。方法 分离培养SD大鼠心肌细胞，将rAAV9携带FrzA基因转导至心肌细胞，在rAAV9表达高峰时建立心肌细胞缺血缺氧模型。随机分为空白组、缺血缺氧组、缺血缺氧+rAAV9-CMV-eGFP组(空病毒组)、缺血缺氧+rAAV9-CMV-FrzA组 (FrzA组)。采用RT-PCR检测各组心肌目的基因FrzA的表达；Western blotting 测定心肌细胞Wnt信号通路关键分子Dvl-1、β-catenin、c-Myc水平及凋亡相关蛋白Bcl-2、Bax的表达。结果rAAV9转染第5天，目的基因FrzA在心肌细胞中高表达(P<0.05)。缺血缺氧组、空病毒组、FrzA组Wnt信号通路关键分子Dvl-1、β-catenin、c-Myc表达及凋亡蛋白Bax/Bcl-2值较空白组明显升高(P均<0.05)。FrzA组心肌细胞中Wnt信号通路关键分子Dvl-1、β-catenin、c-Myc表达及凋亡蛋白Bax/Bcl-2值低于缺血缺氧组、空病毒组(P均<0.05)。结论 rAAV9介导的FrzA基因转导可有效干预Wnt信号通路，抑制其活性，从而减轻心肌细胞凋亡。

心肌细胞；缺血缺氧；重组9型腺相关病毒；FrzA基因；Wnt信号通路；细胞凋亡

心肌细胞缺血缺氧是导致心肌细胞凋亡、造成心肌梗死的重要病理基础[1]。Wnt信号通路是一个调节机体生长发育、疾病、衰老及细胞分化凋亡的重要信号通路，在动物心脏发育过程中起到关键作用[2]。大量研究表明，Wnt信号通路在成人健康的心脏中是沉默的，心肌梗死后Wnt信号通路被持续激活，从而刺激细胞凋亡，加速心室重塑的进程[3～5]。可溶性Frizzled相关蛋白1(FrzA)是一种分泌型糖蛋白，它通过与Wnt信号通路的特异性受体卷曲蛋白受体竞争性结合Wnt蛋白，从而抑制Wnt信号通路的活性[6]。……