植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响

王侃，高晓丽，田文艳，岳天孚

(天津医科大学总医院，天津300052)



植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响

王侃，高晓丽，田文艳，岳天孚

(天津医科大学总医院，天津300052)

摘要：目的观察植酸酮对宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响。方法 体外培养Caski细胞株(含HPV16)与Hela细胞株(含HPV18)，将所有细胞分成实验1、2、3、4组和对照组，每组均包含Caski细胞和Hela细胞。实验1、2、3、4组分别加入含58.6、117、586、5 860 mg/L植酸酮的培养液，对照组加入不含植酸酮的培养液。各组培养72 h后，采用real-time PCR法分别检测HPV16/18 E6/E7 mRNA，采用Western blotting法检测E6/E7蛋白。结果实验1、2、3、4组同一型别细胞中E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量低于对照组，且实验1、2、3、4组E6/E7 mRNA及蛋白相对表达量依次降低(P均<0.05)。各实验组内，Caski细胞中E6/E7 mRNA相对表达量低于Hela细胞(P均<0.05)。各实验组内同一型别细胞中，E6 mRNA相对表达量低于E7 mRNA(P均<0.05)。结论 植酸酮可下调人宫颈癌细胞株中HPV16/18 E6/E7 mRNA及蛋白表达，且作用呈剂量依赖性；植酸酮对HPV16 E6/E7 mRNA的抑制作用强于HPV18 E6/E7 mRNA，并可能以抑制E6 mRNA表达为主导。

关键词：植酸酮；人乳头瘤病毒16；人乳头瘤病毒18；E6蛋白；E7蛋白；宫颈癌；Caski细胞株；Hela细胞株

高危型人乳头瘤病毒(HPV)持续感染是宫颈癌发生的重要原因[1~3]。植酸酮是一种植物提取物，前期研究[4, 5]发现，植酸酮治疗高危型HPV感染合并CIN Ⅰ有显著疗效，并能有效抑制宫颈癌Hela细胞生长。HPV基因整合进人类宫颈细胞后，E6、E7蛋白表达失控，并与致癌基因p53、Rb相互作用，发挥致癌作用[6~8]。研究[9]表明，Caski细胞株和Hela细胞株分别整合了HPV16、HPV18基因，且不存在交叉。本研究观察了不同浓度植酸酮对宫颈癌Caski细胞株(含HPV16)与Hela细胞株(含HPV18)中E6/E7 mRNA及蛋白表达的影响，为植酸酮抗HPV治疗宫颈病变提供理论依据。

1材料与方法

1.1实验材料与试剂Hela细胞由南开大学生命科学院刘新奇教授实验室惠赠，腺癌细胞，含HPV18基因；Caski细胞由中国医学科学院基础医学研究所惠赠，鳞癌细胞，含HPV16基因；植酸酮妇科清洗装置Ⅱ型(植酸酮1号)由天津贤博医疗科技有限公司惠赠。……