Orexin-A对大鼠海马神经细胞凋亡的影响及机制

池恒，李国华，唐吉友

(1山东省千佛山医院,济南250014；2泰山医学院；3济南市第三人民医院)



Orexin-A对大鼠海马神经细胞凋亡的影响及机制

池恒1，2，李国华3，唐吉友1

(1山东省千佛山医院,济南250014；2泰山医学院；3济南市第三人民医院)

摘要：目的探讨Orexin-A对大鼠海马神经细胞凋亡的影响及作用机制。方法 提取36只Wistar大鼠的海马神经细胞，培养后随机分为空病毒组、PLCβ1组、PLCβ4组，分别用空病毒和携带目的基因PLCβ1、PLCβ4的慢病毒转染沉默目的基因，各组各自取一半细胞加入Orexin-A(100 nmol/L)培养8 h，用流式细胞术测算各组细胞凋亡指数，Western blotting法检测海马神经细胞外信号调节激酶(ERK)1/2的表达。结果与不加Orexin-A比较，加Orexin-A后空病毒组、PLCβ4组海马神经细胞凋亡率降低、ERK1/2表达升高(P均<0.05)，而PLCβ1组海马神经细胞凋亡率、ERK1/2表达无明显变化(P均>0.05)。结论 Orexin-A可减少大鼠海马神经细胞的凋亡，该作用可能与OX1R/OX2R-Gq-PLCβ1信号通路有关。

关键词：Orexin-A；海马神经细胞；细胞凋亡；细胞外信号调节激酶1/2；大鼠

Orexin是下丘脑产生的一种神经肽，包括Orexin-A、Orexin-B。Orexin主要通过两个G蛋白偶联受体(OX1R、OX2R)发挥作用。其中，Orexin-A不仅能激活OX1R，也能激活OX2R，Orexin-B只能激活OX1R[1,2]。Orexin-A参与睡眠-觉醒的调节。研究表明，OX1R和OX2R被Orexin-A激活后，通过与多种G蛋白结合启动细胞内的多条信号转导途径[3]。其中，Gq蛋白/磷脂酶C(PLC)/蛋白激酶C(PKC)是Orexin-A的关键信号途径，可通过激活细胞外信号调节激酶(ERK1/2)的磷酸化影响细胞凋亡。2014年11月~2015年8月，我们通过慢病毒转染沉默PLCβ1、PLCβ4的基因表达，探讨Orexin-A对海马神经细胞的作用及机制，为发作性睡病等睡眠障碍及其引起的学习记忆功能损害的患者提供新的治疗靶点。

1材料与方法

1.1材料出生24 h内Wistar大鼠36只(山东大学实验动物中心提供)，雌雄不拘,营养良好；……