正交试验设计法筛选印度块菌液体培养基

马欣燕+王国正+郭成金

摘要： 为筛选出印度块菌（Tuber indicum）最适用的液体培养基，以印度块菌菌丝体生物量为测量指标，采用L9（34）正交试验方法对各配比的印度块菌液体培养基进行研究。结果表明，印度块菌最适液体培养基为20.00 g/L葡萄糖，15.00 g/L麦芽糖，1.50 g/L蛋白胨，2.50 g/L酵母浸粉，3.00 g/L KH2PO4，1.50 g/L MgSO4·7H2O，0.008 g/L维生素B1，pH值自然。25 ℃、120 r/min摇瓶培养120 h，其菌丝生物量干质量可达9.58 g/L。

关键词： 印度块菌；正交试验；液体培养基；菌丝体；生物量

中图分类号： S646.04 文献标志码： A 文章编号：1002-1302（2016）03-0200-03

印度块菌（Tuber indicum）属子囊菌门（Ascomycota）盘菌纲（Pezizomycetes）盘菌目（Pezizales）块菌科（Tuberaceae）块菌属（Tubera）[1]，是一种极为珍贵的菌根食用菌。印度块菌主要分布在中国西南地区的云南省、四川省；云南省主要分布在昆明、曲靖、丽江、玉溪、保山、楚雄州、大理州、迪庆州、怒江州等地，四川省主要分布在攀枝花地区、凉山州[2]。印度块菌常生长于云南松、华山松林及高山栎下[3]。据报道，我国出产的印度块菌所含糖、蛋白质、氨基酸、矿物质、维生素等成分很高，可与黑孢块菌（Tuber melonosporum）相媲美[4]。此外，印度块菌所含有的活性成分如块菌多糖、α-雄烷醇等具有提高免疫力、抗氧化、抗肿瘤及调节女性月经等功效[5-9]。

至今，国内外对印度块菌的研究报道主要是在活性物质特性、提取纯化[5-10]、人工栽培[11-12]等方面，未见印度块菌液体培养基筛选方面的相关研究报道。笔者试图通过碳、氮源单因素试验并结合L9（34）正交试验方法的研究，筛选出印度块菌最适液体培养基，旨在为印度块菌菌种生产、原生质体融合、紫外诱变育种以及液体发酵活性物质提取等研究提供理论依据和技术支持。……