多西他赛联合BEZ235对Kras基因突变的肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制

程留奇，张中冕，王海莉，庄琰，李静

(郑州大学第二附属医院，郑州450000)

多西他赛联合BEZ235对Kras基因突变的肺腺癌A549细胞凋亡的影响及机制

程留奇，张中冕，王海莉，庄琰，李静

(郑州大学第二附属医院，郑州450000)

目的 观察多西他赛联合BEZ235不同作用方式对Kras基因突变的A549细胞凋亡的影响，探讨其作用机制。方法 体外培养Kras基因突变的人肺腺癌A549细胞，采用不同浓度多西他赛(2.5、5、10、20、40 μg/L)和BEZ235(1.25、2.5、5、10、20 μmol/L)干预24、48、72 h；MTT法检测细胞增殖抑制率，确定BEZ235的最佳干预浓度为17.5 μmol/L、多西他赛的最佳干预浓度为15.3 μg/L，二者最佳干预时间均为48 h。另取人肺腺癌A549细胞，随机分为对照组(耐药组)、多西他赛单药组、BEZ235单药组、BEZ235同步多西他赛组(两药同时应用)、多西他赛序贯BEZ235组(给予多西他赛24 h改用BEZ235 24 h)、BEZ235序贯多西他赛组(给予BEZ235 24 h改用多西他赛24 h)，均给予最佳干预时间及最佳干预浓度，采用流式细胞术检测各组细胞凋亡率，Western blotting法检测pAKT、pERK蛋白表达。结果 对照组、多西他赛单药组、BEZ235单药组、BEZ235同步多西他赛组、多西他赛序贯BEZ235组、BEZ235序贯多西他赛组A549细胞凋亡率逐渐升高(P均<0.05)，pAKT蛋白相对表达量逐渐降低(P均<0.05)。BEZ235单药组pERK蛋白相对表达量与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)，但均高于其他各组(P均<0.05)。结论 多西他赛和BEZ235不同联合作用方式作用下均可促进Kras基因突变的A549细胞凋亡，以BEZ235序贯多西他赛效果最好；降低pAKT及pERK表达，协同抑制PI3K/AKT/mTOR和Raf/MEK/ERK通路可能是其作用机制。

肺癌；多西他赛；BEZ235；Kras基因； A549细胞

肺腺癌是肺癌的主要类型[1]，约20%的肺腺癌患者出现Kras基因突变[2]，这部分患者对多数靶向治疗药物不敏感[3]。Kras基因是ras基因家族的主要成员，人肿瘤细胞中Raf/MEK/ERK通路和PI3K/AKT/mTOR通路是ras信号传导通路下游的两条重要通路。多西他赛是目前肺腺癌的一线化疗药物，通过抑制细胞有丝分裂而发挥抗肿瘤作用。BEZ235是阻断PI3K和mTOR的双重靶向抑制剂。多西他赛可增强BEZ235对前列腺癌细胞的敏感性[4]，提示多西他赛可能对Raf/MEK/ERK通路有一定的抑制作用。……